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- 2022-09-26 13:42:51
不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应、琼脂扩散试验、酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
抗原通常是由多个抗原决定簇组成的,单克隆抗体技术服务,由一种抗原决定簇刺激机体,由一个B淋巴细胞接受该抗原刺激所产生的抗体称之为单克隆抗体(MonoclonalAntibody)。
(一)抗原制备
Ig 是免疫球蛋白,对异种动物而言,是良好的抗原物质。可以刺激异种动物产生抗 Ig 血清,经适当提取后,产生抗 Ig 抗体,又叫第二抗体或抗抗体。在多数的间接标记反应中,均需制备抗 Ig 抗体。
(二)材料与试剂1.提取的动物 Ig2.弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂3.penicillin 和 streptomycin 4.实验动物 兔5.其它材料及试剂
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有 unlimited 繁殖能力的marrow瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原表位的特异性抗体,即单克隆抗体。