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- 发布时间
- 2022-09-28 15:46:18
6、潜热点应该出现在缓慢降温的第二步结束进入快速拉大温差的第三步前期;7、如潜热点位置出现时刻不对,可根据冻存曲线图调整第二步的结束温度点,形成新的优化程序,并进行新样品验证;8、复苏率是检验冻存是否成功的重要标准,有时即使曲线少有异常,但只要复苏效果好,可不关注;9、降温完成后快速转移样品至液氮罐,让其原生质形成玻璃化状态。转移过程中谨防升温幅度过大(近距离转移,或放冻存容器中转移)。
细胞往往会在温度剧烈变化中。通过使用细胞欣谕程序降温仪,选择合适的冻存液,胚胎冷冻仪,设定合适的升降温速率,可有效地克服上述不利因素。实践证明,(经温度补尝后)每分钟1-3℃的冷冻速率可大大提高冻存细胞的存活率。传统的生物样本降温通常采用-80℃低温冰箱进行分步骤冷冻,该方法的不足为:耗时长,整个降温过程大约需要一天的时间;在降温过程中需要人为多次转移,给样本的降温带来众多不可控因素,从而导致样本的存活率降低;无法有效地消除结晶过程中释放的潜热,增大了样本的率。