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- 苏州博特龙免疫技术有限公司
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- 0512-68216582
- 手机
- 13552826508
- 发布时间
- 2022-10-03 01:35:02
了解产品参数及价格,请百度搜索“博奥龙”,进入博奥龙官0网,制备服务,搜产品名称即可报价信息。欢迎在咨询~
博奥龙公司主要产品有抗0体制0备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
Western Blot-抗0体检测技术服务?
一、服务内容
1、从动物细胞、人或动物组织、细菌、植物等样品中提取蛋白,重组蛋白、血0清、培养上清等样品
2、对样品中蛋白进行半定量分析
3、Western blot检测
(1) 电泳:聚丙0烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品
(2) 湿法转印(BLOTING:Tank Transfer)
(3) 杂交:用抗0体鉴定膜上的特定蛋白(INCUBATION: Antibody)
(4) 化学发光检测(ECL),胶片曝光,uant软件读取IOD值(可选)
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多抗制备的概念:由多个B淋巴细胞克0隆所产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可与多种抗原表位结合的抗0体。多抗制备主要包括以下几个步骤:免0疫动物、佐剂、免0疫原、免0疫、取血等。
多抗制备的制备步骤
一、器材
剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼0科手术镊子(游离血管用)一把、直头眼0科手术剪(剪血管用)一把,手术刀架,手术刀片,注0射器(1ml、10ml,25ml)附针头,兔子固定架,灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把,直头止血钳两把,手术缝合线,塑料放血管,纱布等。
二、试剂
生理盐水
弗氏完全佐剂
弗氏不完全佐剂
二甲0苯,酒精棉,脱脂棉,2% NaN3
三、免0疫原:蛋白或KLH偶联的多肽。每次免0疫100-200μg免0疫原。
四、兔子的选择
兔子的重量应在四斤以上,两耳光滑,明显可见耳静、动脉,健康。
五、免0疫
用生理盐水稀释免0疫原,然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂,将该乳剂在兔子双肩周围的皮肤下进行皮下0注0射和后大腿进行肌肉注0射。每个区域大约用1/4的免0疫原。这样免0疫原可以持久存在从而提高免0疫应答。
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服务项目说明
客户要求加可曝光marker的,需事先说明,并按照可曝光项目收费
1、提供的蛋白量与目的待检测的蛋白数量有关,蛋白数量增加相应的样品量也要增加
2、胞浆、胞核蛋白抽提样品来源为:哺乳动物细胞、动物组织。如果1个样品分别提取胞浆、胞核蛋白后,蛋白定量时以2个样品计算
3、每张膜样品数量为1-8个,不足8个以8个收取。9-16个样品为2张膜,17-24个样品为3张膜;以此类推
举例:7个样品,1个目的蛋白,算1张膜;有9个样品,1个目的蛋白,算2张膜
7个样品,2个目的蛋白,算2张膜,有9个样品,2个目的蛋白,算4张膜
以上为一般算法。如果客户样品数量需要按照组别等来进行上样时需要重新确定每张膜的上样量及膜的张数