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- 2022-10-08 13:42:26
β-内酰胺酶测量分析仪碘量法
[原理]β-内酰胺酶能裂解青霉的β-内酰胺环形成青霉唑酸,它与淀粉竞争游离碘,乳品β内酰胺酶测量报价,破坏了碘和淀粉的兰色复合物,使兰色变为无色。
[方法] ①将0.25克.青霉溶于41.7mlPH6.0 的磷酸盐缓冲液中,牛奶β内酰胺酶测量报价,使其浓度成6000ug/ml。 取0.1ml
于一小试管中。
②将培养18-24小时的细菌在含青霉试管内制成浓厚菌悬液(109/ml)。
③在37"C水浴中放置30分钟,不时摇动,使酶能破坏青霉。
④加入1%可溶性淀粉溶液0.5ml,摇匀。
⑤加入碘液 0.02 ml。
⑥在 37°C水浴中放置10分钟,观察结果。
[结果]在10分钟内能使兰色完全消退的菌株为β-内酰胺酶阳性,不消退者为阴性。
[注意事项]
①由于青霉很容易分解,因而用于实验的青霉应新鲜配制。
②淀粉也新鲜配制,在100ml蒸馏水中加入1克可溶性淀粉,放到开水中水浴直到淀粉溶解。
③实验应 按照步骤操作,如果碘加得过早,酶反应就会停止,营口β内酰胺酶测量报价,产生假阴性结果。
④每次试验用阳性和阴性对照。
β-内酰胺酶测量分析仪酸测量法:
青霉被β-内酶胺酶水解后成青霉酸,pH值下降到6.8以下,用酚红指示剂,由红(紫)色 (原液:枸橼酸缓冲液pH8.5) →黄色(pH6.8以下);淀粉-碘测定法:β内酰胺酶破坏β内酰胺环,碘与被打开β内酰胺环结合,使蓝色的淀粉-碘复合物转变成无色。β-内酰胺酶是多种不同类型以β-内酰胺类为底物的降解酶,通过水解β-内酰胺环造成β-内酰胺类失去活性,将待测菌与头硝作用一定时间后,如待测菌产生青霉酶,则可水解头硝的β-内酰胺环,颜色由黄色变为红色。
β-内酰胺酶测量分析仪工作原理
β-内酰胺酶活性检测试剂盒为测量发酵培养基和细菌培养物中βL分泌细菌的βL活性提供了简便的方法。它还可用于检测受哺乳动物的唾液、尿液和中以及食物样本中的βL分泌细菌。该试剂盒通过水解一种发色菌素——硝基,产生与所含酶活性成比例的比色产物(A490),从而测量βL活性。一个β-内酰胺酶活性单位是指在pH 7.0、25℃下,每分钟水解1.0 μM硝基所需的酶量。