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- 发布时间
- 2022-10-09 19:54:51
凝胶是一类多孔性高分子聚合物,每个颗粒犹如一个筛子。当样品溶液通过凝胶柱时,相对分子质量较大的物质由于直径大于凝胶网孔而只能沿着凝胶颗粒间的空隙,树脂柱规格,随着溶剂流动,因此流程较短,向前移动速度快而首先流出层析柱;反之,相对分子质量较小的物质由于直径小于凝胶网孔,可自由地进出凝胶颗粒的网孔,树脂柱生产商,在向下移动过程中,它们从凝胶内扩散到胶粒孔隙后再进入另一凝胶颗粒,如此不断地进入与逸出,使流量增长,移动速率慢而后流出层析柱。而中等大小的分子,它们也能在凝胶颗粒内外分布,部分进入颗粒,从而在大分子物质与小分子物质之间被洗脱。这样,经过层析柱,使混合物中的各物质按其分s子大小不同而被分离。
层析柱装柱步骤流程
1.计算每厘米柱床高度填料的数量;
2.选择合适的配件和末端筛网,选择不合适的滤网可能导致较高反压或填料泄露;
3.选择装柱流速
首先:拍排泡
第二:调水平
第三:匀浆
第四:装柱
第五: 绘制压力/流速曲线,装柱流速为大流速的70%-****。
柱效检测
柱效主要取决于装柱质量。如果是离子交换或亲和层析填料,则不能使用有色物质,如蓝色葡聚糖。表征柱效的两个指标是理论板当量高度(HETP)和对称因子As,使用NaCl或通过测定UV吸收或电导率进行计算。
使用NaCl溶液进行测定,优点样品是易得、安全,树脂柱生产厂家,缺点是可能与填料发生反应,特别是离子交换树脂,因此影响测定结果。使用进行测定,其不与层析填料发生反应,并且可通过检测280 nm处的紫外吸收进行测定,并且,测定缓冲液的浓度可提高至10倍。
大孔吸附树脂的结构及吸附原理
大孔吸附树脂的结构包括化学结构和物理结构。通过带有各种功能基团的单体或聚合物进行功能基反应,可以得到不同化学结构的吸附树脂。而大孔吸附树脂的物理结构主要是孔结构,它是在合成时加入惰性的制孔剂,待网络骨架固化和链结构单元形成后,树脂柱,再用溶剂萃取或水洗蒸馏将其去掉,就留下了不受外界条件影响的孔隙。
大孔吸附树脂是集筛选和吸附于一体的多孔材料,对于吸附质的吸附主要是物理吸附。物理吸附的实质是基于树脂表面上的原子力场不饱和而有表面能,因而可以吸附某些分子以降低表面能;吸附作用主要是范德华力或氢键绑定的结果,吸附过程取决于温度、压强、表面积的大小,与表面的微观结构关系不大。吸附剂从溶液中吸附溶质分子后,溶液的浓度将降低,而被吸附的分子将在固体表面上浓聚,其结果一般是引起体系内放热和自由能的下降。