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- 苏州博特龙免疫技术有限公司
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- 0512-68216582
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- 发布时间
- 2022-10-10 15:55:51
了解产品参数及价格，请百度搜索“博奥龙”，进入博奥龙官0网，搜产品名称即可报价信息。欢迎在咨询~
博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
单克0隆抗0体的大量制备
单克0隆抗0体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
1、体内诱生法 取Balb/c小鼠。
首先腹腔注0射0.5ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克0隆抗0体。约1-2周，可见小鼠腹部膨大。用注0射器抽取腹0水，即可获得大量单克0隆抗0体。
2、体外培养法
将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中，杂交瘤细胞产生并分泌单克0隆抗0体，收集培养上清液，离心去除细胞及其碎片，即可获得所需要的单克0隆抗0体。但这种方法产生的抗0体量有限。近年来，各种新型培养技术和装置不断出现，大大提高了抗0体的生产量。
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注意事项：
1、Actin抗0体在Western实验后，注意回收稀释的抗0体。回收的抗0体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗0体，包括已经使用过的稀释抗0体，4℃保存。
2、 回收后重复使用的抗0体，使用方法同新鲜稀释的抗0体。如果在重复使用过程中发现抗0体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗0体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，制备服务，则可以考虑废弃该抗0体。
3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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血0清的分离
如果用三角瓶或平皿盛血，将器皿倾斜放置于37oC烘箱2hr，转移到4oC沉淀过夜，第二天早上用吸管吸取血0清。如果用离心管收集，37oC烘箱放置2hr，转移到4oC沉淀过夜，第二天早上离心，10000RCF，10分钟。在血0清中加入NaN3 至终浓度0.02%，分装后-20oC保存。
小结：抗血0清获得之前要件的抗0体的效价、抗0体的特异性以及抗0体的亲和力；获得抗血0清之后，要分装保存抗血0清，一般情况下，-20度可保存数月至数年抗0体的效价都不会发生变化。抗0体的效价可以通过琼脂扩散试验和酶联免0疫吸附试验进行鉴定。