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- 2022-10-14 13:19:15
因此,一般的建议步骤是活化羧基使用pH=5-6的MES缓冲液,之后使用PBS缓冲液调节pH=7.2-7.5完成后的偶联反应。
与EDC/NHS类似的是,玻璃表面氨基化原理,也可以使用将两个含有氨基的分子连接到一起。比如,先在纳米粒子外包一层二氧化硅,通过APTES等试剂引入氨基,表面氨基化的意义,之后通过将氨基修饰的纳米晶和蛋白质的氨基偶联到一起。
2.生物学意义分析
主要指通过分析芯片杂交数据,研究差异表达基因的生物学意义。通常,表面氨基化的方法,在芯片中某一或发育时期可能有成千上万个差异表达基因。例如,基因芯片分析植物根部可能有400多个特意表达的基因,如果要将这些基因的来龙去脉都搞清楚,可能要追溯超过4000篇以上的文献(假设1个基因需要查阅10篇文献)。这种不捡重点的方法耗时耗力,所获得的结果也往往没有意义。
2)用点样法固定在玻璃板上的DNA探针阵列,通过与荧光标记的靶基因杂交进行检测。这种方法点阵密度可有较大的提高,各个探针在表面上的结合量也比较一致,但在标准化和批量化生产方面仍有不易克服的困难。3)在玻璃等硬质表面上直接合成的寡核苷酸探针阵列,广西表面氨基化,与荧光标记的靶基因杂交进行检测。该方法把微电子光刻技术与DNA化学合成技术相结合,可以使基因芯片的探针密度大大提高,减少试剂的用量,实现标准化和批量化大规模生产,有着十分重要的发展潜力。