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- 苏州博特龙免疫技术有限公司
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- 发布时间
- 2022-10-17 14:06:22
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博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
什么是单克0隆抗0体?
单克0隆抗0体(MAb),是针专一的抗原决定簇产生的抗0体,单克0隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年,由G.K?hler和Milstein创立。主要原理是利用产生抗0体的B细胞与肿0瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,制备服务,生产抗0体。
单克0隆抗0体制备的原理是什么?
要制备单克0隆抗0体需先获得能合成专一性抗0体的单克0隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨0髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨0髓瘤细胞与免0疫的淋巴细胞二者合二为一,得到杂0种的骨0髓瘤细胞。这种杂0种细胞继承两种亲代细胞的特性,它既具有B淋巴细胞合成专一抗0体的特性,也有骨0髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性,用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群,可制备抗一种抗原决定簇的特异单克0隆抗0体。
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实验步骤:
1、弃去板内液体,洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。再在每个标本的6孔中分别加入6种酶标二抗各100μl,通用阳性、阴性对照的各孔也一样。在加样图上或酶标板上做好标记。贴上封板膜37℃温育30分钟。
2 、吸弃板内液体,洗板5遍后在不掉纤维的吸水材料上拍干或机洗5遍。每孔分别加入显色剂 A 和显色剂 B 各50μl,换一张新的封板膜贴板避光37℃显色20分钟。
3 、ELISA试剂盒特异性好一般肉眼即可观察出结果,看显色蓝的那个孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig 类或亚类。更可将反应终止液(每孔50μl)终止反应后用酶0标仪450nm 测长,630nm 参考波长双波长测定结果,参看高值孔所对应的酶标二抗就知道此标本的 Ig 类或亚类(阳性对照 OD 一般不小于0.8,阴性对照一般不高于0.15,阳性判定标准:样品 OD 大于阴性 OD 0.15,阴性 OD 低于0.05按0.05算)。
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Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。同时Actin在细胞分泌、吞噬、locomotion、cytosmic streaming和cytokinesis等过程中起重要作用。Actin在不同物种之间高度保守,以至于很难获得较好的针对actin的抗血0清。Actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织特异性的,包括α-skeletal muscle actin,α-cardiac muscle actin,α-smooth muscle actin,和γ-smooth muscle actin; 其余两种广泛分布于各种组织中,包括β-actin(β-non-muscle)和γ-non-muscle actin。不同的actin之间同源性大于90%,但在N-terminal同源性仅50%-60%,因此N-terminal常被用作actin的抗原。