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亲和层析柱装柱注意事项

一文了解亲和层析柱装柱注意事项

1.洗脱

亲和层析的另一个重要的步骤就是要选择合适的条件使待分离物质与配体分开而被洗脱出来。亲和层析的洗脱方法可以分为两种：特异性洗脱和非特异性洗脱。

（1）特异性洗脱

特异性洗脱是指利用洗脱液中的物质与待分离物质或与配体的亲和特性而将待分离物质从亲和吸附剂上洗脱下来。

特异性洗脱也可以分为两种：一种是选择与配体有亲和力的物质进行洗脱，另一种是选择与待分离物质有亲和力的物质进行洗脱。前者在洗脱时，选择一种和配体亲和力较强的物质加入洗脱液，这种物质与待分离物质竞争对配体的结合，在适当的条件下，如这种物质与配体的亲和力强或浓度较大，配体就会基本被这种物质占据，原来与配体结合的待分离物质被取代而脱离配体，从而被洗脱下来。

例如用凝集素作为配体分离糖蛋白时，可以用适当的单糖洗脱，单糖与糖蛋白竞争对凝集素的结合，可以将糖蛋白从凝集素上置换下来。

　　

离子交换柱主要是利用离子交换树脂中的离子与原水（液）中的某些离子进行交换而将其除去，使水（液）得到净化的方法.

1.树脂的选择和处理

在化学分析中应用多的为强酸性阳离子交换树脂和强碱性阴离子交换树脂.使用时应当先过筛以除去太大和太小的颗拉，也可以用水泡胀后用筛在水中选取大小一定的颗粒备用.

一般商品树脂含有一定杂质，使用前必须进行净化处理.强碱性和强酸性阴阳离子交换树脂，通常用4mol/LHCl溶液浸泡1-2天，以溶解各种杂质，然后用蒸馏水洗涤至中性.如果需要钠型阳离子交换树脂，则用NaCl处理氢型阳离子交换树脂.

2.装柱

进行离子交换通常在离子交换柱中进行.离子交换柱一般用玻璃制成，装置交换柱时，先在交换柱的下端铺上一层玻璃丝，大孔树脂柱供应，灌入少量水，然后倾入带水的树脂，大孔树脂柱厂家，为防止加试液时树脂被冲起，在柱的上端亦应铺一层玻璃纤维.交换枝装好后，再用蒸馏水洗涤，关上活塞，以备使用.应当注意不能使树脂露出水面，因为树脂露于空气中，当加入溶液时，大孔树脂柱多少钱，树脂间隙中会产生气泡，大孔树脂柱，而使交换不完全.

交换柱也可以用滴定管代替.

3.交换

将试液加到交换柱上，用活塞控制一定的流速进行交换.

4.洗脱

当交换完毕之后，一般用蒸馏水洗去残存溶液，然后用适当的洗脱液进行洗脱.在洗脱过程中、上层被交换的离子先被洗脱下来，经过下层未被交换的树脂时，又可以再度被交换.

阳离子交换树脂常采用HCl溶液作为洗脱液；阴离子交换树脂常采用NaCl或NaOH溶液作为洗脱液.洗脱之后的树脂已得到再生，用蒸馏水洗涤干净即可再次使用.

柱头安装是否合适及是否严密的检查

1、检查下柱头是否按图纸要求安装?（要求按图纸要求安装）

2、检查下柱头内，是否安装了防止吸附剂（例如硅胶）漏出的滤布（或滤网）。

3、所用滤布（滤网）的材质要求能耐所用溶剂的腐蚀，而且孔径很小，一般要求使用500目以上孔径大小的滤布（网）。

4、下柱头安好，紧固后，从柱上端（开口）加入所用洗脱剂中极性较小的一种溶剂（例如已烷、、等），使溶剂液面比下柱头上部分离出20-30厘米，仔细观察下柱头是否漏溶剂。如果漏，则必须坚固（或重装），直至不漏为止。

5、检查确实不漏后，放出柱内溶剂，准备装吸附剂（例如硅胶等）。

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