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- 发布时间
- 2022-10-25 10:12:37
为了提高dna分子的稳定性,通常将dna固定在固态基质表面。dna的共价固定在pcr、分子检测等领域拥有广泛的应用,现有技术中,微阵列基片是什么,常用共价固定dna分子的技术主要包括利用肽键的方式、利用各种硅烷偶联剂的方式、利用巯基的方式等,常用于dna固定化的固态基质有金刚石、金属、金属氧化物、陶瓷、塑料等,上述材料拥有良好的物理性能,然而由于上述材料多孔结构的制备较为复杂,微阵列基片的价格,所以通常dna是直接固定在材料的外表面上。
二、黏附剂的使用
1.多聚左旋赖氨酸(poly-1-lysine)
首先配制0.1%(ω/υ)多聚左旋赖氨酸浓缩液,室温下(18~26℃)可保存1年。使用时,广西微阵列基片,将试剂10倍稀释成工作液,浓度为0.01%(ω/υ),2-8℃冰箱保存,有效期3个月。使用方法是将充分洗净和预先干燥的玻片浸泡于稀释后的多聚左旋赖氨酸溶液数十秒或提拉十次,沥干.于室温下晾干12-24小时或在45℃以下烤箱内烘干。处理后的玻片避光干燥可保存三个月。
该方法的主要优点是可以用很少的步骤合成极其大量的探针阵列。例如,合成 48 ( 65536 ) 个探针的 8 聚体寡核苷酸序列仅需 4 × 8=32 步操作, 8 小时就可以完成。而如果用传统方法合成然后点样,那么工作量的巨大将是不可思议的。同时,微阵列基片的处理,用该方法合成的探针阵列密度可高达到 106/cm2 。不过,尽管该方法看来比较简单,实际上并非如此。