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- 苏州博特龙免疫技术有限公司
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- 发布时间
- 2022-10-30 11:14:55
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博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类齐全的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
单克0隆抗0体的大量制备
单克0隆抗0体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。
1、体内诱生法 取Balb/c小鼠。
首先腹腔注0射0.5ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克0隆抗0体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注0射器抽取腹0水,即可获得大量单克0隆抗0体。
2、体外培养法
将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克0隆抗0体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克0隆抗0体。但这种方法产生的抗0体量有限。近年来,制备服务,各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗0体的生产量。
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不同细胞表面具有不同Ig的Fc受体,分别用FcγR、FcεR、FcαR等来表示。当Ig与相应抗原结合后,由于构型的改变,其Fc段可与具有相应受体的细胞结合。抗0体与Fc受体结合可发挥不同的生物学作用:
1.介导I型反应变应原刺激机体产生的IgE可与嗜碱性粒细胞、肥大细胞表面IgE高亲力受体细胞脱颗粒,释放组胺,合成由细胞FcεRI结合。
2.调理吞噬作用 调理作用(opsonization)是指抗0体、补体C3b、C4B等调理素(opsonin)促进吞噬细菌等颗粒性抗原。
3.发挥抗0体依赖的细胞介导的细胞毒作用。
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抗0体亚型鉴定原理:
抗0体亚型鉴定的原理是利用双抗0体夹心法鉴定小鼠淋巴细胞杂交瘤培养上清中单克0隆抗0体或特异亲和纯化的单克0隆抗0体的类和亚类(可区分出 IgG1﹨IgG2a﹨IgG2b﹨IgG3﹨IgM﹨IgA)。采用小鼠抗0体共有位点的二抗包被微孔板,与加入的培养上清中的小鼠抗0体结合,再加入HRP 标记的抗小鼠各类、亚类的抗0体来分别反应,zui后用 TMB 底物系统显色并用稀硫酸终止,再通过酶0标仪检测吸光度来判断被测单克0隆抗0体的类或亚类。