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- 发布时间
- 2022-11-10 01:14:11
不管是哪一种ELISA,它的操作都由以下几种基本的操作组合而成:①将抗原或抗体吸附到固相载体上;②加入待检样品以及后续试剂;③温育;④洗涤去掉游离未结合的反应物;⑤加入酶检测底物;⑥结果的判读。
ELISA操作步骤复杂,影响反应因素较多。
测定小分子量物质常用竞争法,其标准曲线中吸光度与受检物质的浓度呈负相关。
elisa试剂盒回收率是反应待测物在样品分析过程中的损失的程度,CAMP/CGMP 代检测,损失越少,回收率越高。
制备方法
包括以下步骤:1)抗原表位的计算机筛选;2)抗原的制备;3)血清的采集;4)间接ELISA方法的建立;5)间接ELISA方法的敏感性和特异性验证;6)试剂盒的稳定性验证;7)对屠宰场进行临床检测。
该方法简单、快速、灵敏度高、特异性强、稳定性合格、重复性好。
ELISA操作步骤复杂,影响反应因素较多。
测定大分子量物质的夹心法ELISA,标准曲线的范围一般较宽,曲线ZUI高点的吸光度可接近2.0,绘制时常用半对数值,以检测物的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,将各浓度的值逐点连接,所得曲线一般呈S形,其头、尾部曲线趋于平坦,中央较呈直线的部分是ZUI理想的检测区域。