- 发布
- 苏州贝蒂克生物技术有限公司
- 电话
- 0512-65757227
- 手机
- 18914017523
- 发布时间
- 2022-11-14 10:07:07
1.简易芯片
制作简易芯片时,河北表面氨基修饰,使用机械臂把大量已知或未知序列的DNA片段点在--张很小的玻璃片(通常为2cmX2cm)或尼龙膜上,再经过物理吸附作用达到固定化(cDNA 芯片)。也可以直接在玻璃板表面进行化学合成,从而得到寡聚核苷酸芯片。将芯片与待研究的eDNA或其他样品杂交,玻璃表面氨基修饰,经过计算机扫描和数据处理,便可以观察到大规模的基因群在不同组织、同一组织不同发育时期或不同生理条件下的表达基因调控情况。简易芯片一般的基因数量少(一般不超过2000),主要用于研究小部分特定基因的表达状态。简易芯片一般可以用于手工制作或者机械手点样。
以合成寡核苷酸探针为例,该技术主要步骤为:首先使支持物羟基化,并用光敏保护基团将其保护起来。每次选取择适当的蔽光膜( mask )使需要聚合的部位透光,其它部们不透光。这样,光通过蔽光膜照射到支持物上,受光部位的羟基解保护。因为合成所用的单体分子一端按传统固相合成方法活化,另一端受光敏保护基的保护,所以发生偶联的部位反应后仍旧带有光敏保护基团。因此,硅表面氨基修饰,每次通过控制蔽光膜的图案(透光与不透光)决定哪些区域应被活化,以及所用单体的种类和反应次序就可以实现在待定位点合成大量预定序列寡聚体的目的。
防脱片用于细胞培养、病理学组织和细胞制片、液基细胞学薄层制片,表面氨基修饰的方法,尤其是在液基细胞学薄层制片中防脱片的质量至关重要,而多聚左旋赖氨酸为目前组织化学染色中的防脱,适合于需要酶消化、微波、高温高压的防脱片处理。如效果不佳,可用双重处理(APES和poly-l-lysine)的切片。在以上两种方法均无效的情况下,可用如下方法:切片在脱蜡前放在APES l:50溶液中浸泡3分钟,晾干后即可进行下一步骤。