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- 2022-11-17 12:24:29
色谱柱的技术都有哪些?比如,封尾等,这些技术在应用时都体现在哪里?
色谱柱技术包括填料技术,封尾技术和装柱技术等,填料技术自不待言,填料的差异对色谱柱分离性能和选择性有决定性影响,色谱填料的键合相密度的不同也会影响到填料表面硅羟基外露的多少,进而影响填料的选择性。封尾技术中用到的封尾试剂的差异也会对色谱柱的性质产生很大的影响,如体现在色谱填料的pH耐受范围,液相色谱多少钱,水相耐受范围,极性强弱等。装柱技术也没有想象中的这么简单,不同固定相、不同粒径、不同柱管内径和长度,装柱工艺都有所不同,要装出紧密、稳定、均一的柱床,更多是一门艺术,需要经验积累。
液相色谱仪
20世纪初在俄国的波兰植物化学家茨维特(Twseet)首先将植物提取物放入装有碳酸钙的玻璃管中,植物提取液由于在碳酸钙中的流速不同分布不同,因此在玻璃管中呈现出不同的颜色,这样就可以对各种不同的植物提取液进行有效的成分分离。
1941年,马丁与辛格用一根装满硅胶微粒的色谱柱,完成了乙酰化氨基的分离,开启了液色谱技术,因此获得诺贝尔化学奖。1949年,马丁建立了色谱保留值与热力学常数之间的关系,奠定了物化色谱的基础;1952年,马丁与辛格又创立了气液色谱法,分离了脂肪酸与脂肪胺。1966年之前科学家所做的努力,液相色谱费用,为传统经典液相色谱奠定了基础。
而液相色谱仪的鼻祖则是由斯坦因与莫尔于1958年设计的氨基酸分析仪,这种仪器能够分蛋白质水解的产物。首台商用LC则是由沃特斯公司制造。
1971年之后,液相色谱技术得到了飞速的发展,HPLC的分析体制也逐步完善。到了二十世纪八十年代中期,液相色谱报价,液相色谱技术已经非常非常成熟,激动人心的新发展日趋减少,人们开始转向相关领域发展,如超临界色谱、毛管电泳色谱、制备色谱等。
液相色谱的五大系统
1、进样系统进样系统分为手动进样阀和自动进样器。
2、输液系统输液泵按输出液恒定的因素分恒压泵和恒流泵。对液相色谱分析来说,输液泵的流量稳定性更为重要,这是因为流速的变化会引起溶质的保留值的变化,液相色谱,而保留值是色谱定性的主要依据之一。因此,恒流泵的应用更广泛。
输液泵按工作方式分为气动泵和机械泵两大类。机械泵中又有螺旋传动注射泵、单活塞往复泵、双活塞往复泵和往复式隔膜泵。
3、分离系统分离系统包括色谱柱、保护柱以及柱温箱。
色谱柱:色谱柱是样品分离的。色谱柱在使用前必须仔细阅读说明书,了解色谱柱使用的pH值范围、溶剂耐受范围、压力范围和维护方法等事项。色谱柱使用完后,需及时对色谱柱进行冲洗。冲洗完成后,应该将色谱柱从仪器上拆下来,两端用厂家配的堵头密封后,保存在色谱柱盒里。
保护柱:保护柱的作用主要是防止吸附性强的杂质对色谱柱污染,从而延长色谱柱的寿命。针对不同型号的色谱柱,应选择相对应填料的保护柱。应注意柱芯也是有寿命的,应该定期进行更换。
柱温箱:色谱柱温度变化,可能会导致保留时间的变化。为了避免这个问题,建议使用柱温箱。
4、检测系统液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。
5、数据处理系统该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。