DNA 固定方法 DNA固定 苏州贝蒂克生物

原位合成法主要为光引导聚合技术，它不仅可用于寡聚核苷酸的合成，DNA的固定方法，也可用于合成寡肽分子。光引导聚合技术是照相平板印刷技术（ photolithography ）与传统的核酸、多肽固相合成技术相结合的产物。半导体技术中曾使用照相平板技术法在半导体硅片上制作微型电子线路。固相合成技术是当前多肽、核酸人工合成中普遍使用的方法，DNA固定，技术成熟且已实现自动化。二者的结合为合成高密度核酸探针及短肽阵列提供了一条快捷的途径。

防脱片的成分为载玻片(盖玻片)、玻片修饰剂(黏附剂)，常用的黏附剂有APES(3-Aminopropyl-Triethoxysilane 3-氨丙基-3-乙氧基)、多聚-L-赖氨酸(Poly-L-Lysine)、明胶、蛋清等。细胞学常用黏附剂为APES和多聚-L-赖氨酸 ，组织学常用明胶、蛋清等。

一、载玻片和盖玻片的处理

将载玻片或培养用的小盖片浸泡在清洁液中24小时，然后流水充分冲洗，再用蒸馏水冲洗3遍以上，DNA固定 玻璃，而后置95%乙醇中12小时。取出擦干或烤干，贮放于玻片盒内备用。盖玻片很薄，以上处理程序必须缩短时间，清洁液浸泡只需2小时，DNA 固定方法，流水冲洗注意勿损伤玻片。

尽管如此，通常原位合成方法仍然比较复杂，除了在基因芯片研究方面享有盛誉的 Affymetrix 等公司使用该技术合成探针外，其它中小型公司大多使用合成点样法。后一方法在多聚物的设计方面与前者相似，合成工作用传统的 DNA 或多肽固相合成仪以完成，只是合成后用特殊的自动化微量点样装置将其以比较高的密度涂布于纤维膜、尼龙膜或玻片上。支持物应事先进行特定处理，例如包被以带正电荷的多聚赖酸或氨基硅烷。现在已有比较成型的点样装置出售，如美国 Biodot 公司的点膜产品以及 Cartesian Technologies 公司的 PixSys NQ/PA 系列产品。前者产生的点阵密度可以达到 400/cm2 ，后者则可达到 2500/cm2 。

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