电固化蛋白 蛋白固化 贝蒂克

二、黏附剂的使用

1.多聚左旋赖氨酸(poly-1-lysine)

首先配制0.1%(ω/υ)多聚左旋赖氨酸浓缩液，室温下(18~26℃)可保存1年。使用时，固化蛋白质，将试剂10倍稀释成工作液，浓度为0.01%(ω/υ)，2-8℃冰箱保存，有效期3个月。使用方法是将充分洗净和预先干燥的玻片浸泡于稀释后的多聚左旋赖氨酸溶液数十秒或提拉十次，蛋白固化，沥干.于室温下晾干12-24小时或在45℃以下烤箱内烘干。处理后的玻片避光干燥可保存三个月。

俄罗斯科学院恩格尔哈得分子生物学研究所和美国阿贡国家实验室（ANL）的科学家们早在文献中提出了用杂交法测定核酸序列(SBH）新技术的想法。当时用的是多聚寡核酸探针。几乎与此同时英国牛津大学生化系的Sourthern等也取得了在载体固定寡核苷酸及杂交法测序的国际。在这些技术储备的基础上，1994年在美国能源部防御研究计划署，俄罗斯科学院和俄罗斯人类基因组计划1000多万美元的资助下研制出了一种生物芯片，并用于检测尽地中海血样的基因突变，电固化蛋白，筛选了一百多个外已知的突变基因。

使用广泛的氨基和羧基偶联剂就要数EDC和NHS（Sulfo-NHS）了。大多数情况下，同时使用EDC/NHS的交联于只使用EDC的，NHS的使用能够极大增强偶联效率。但也有个例，比如2012年的一篇工作（Diagnostics (basel). 2012 Aug 27;2(3):23-33.），他们在APETS修饰的金芯片和96孔板表面组装一抗，发现单独使用EDC比同时使用EDC/NHS和EDC/Sulfo-NHS都。

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