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亲和柱的应用

应用：牛奶中M1的测定

（参考方法GB 541337-2010 食品安全 乳和乳制品中M1 的测定）

样品前处理

称取50g牛奶到具塞离心管中，在水浴中加热到35-37℃，4000转离心15min，除去上层乳脂，全部样品待过柱净化

样品过柱净化

1. 将亲和柱（SBHL-20-0245）连接于10ml或50ml注射管下。

2. 将处理好的样品全部通过亲和柱，控制试样以2mL/min-3mL/min稳定的流速过柱。（注意：空气不能通过柱体）

3. 以稳定的流速淋洗柱子两次，弃去全部流出液，并使2mL-3mL空气通过柱体。

4. 洗脱，流速为1mL/min-2mL/min，收集全部洗脱液于玻璃试管中，海南亲和柱价格，供检测用。

亲和柱——亲和层析的应用

抗原和利用抗原、之间高特异的亲和力而进行分离的方法又称为亲和层析。例如将抗原结合于亲和层析基质上，黄曲霉毒素亲和柱价格，就可以从中分离其对应的。在蛋白质工程菌发酵液中所需蛋白质的浓度通常较低，用离子交换、凝胶过滤等方法都难于进行分离，而亲和层析则是一种非常有效的方法。将所需蛋白质作为抗原，经动物后制备，将与适当基质偶联形成亲和吸附剂，就可以对发酵液中的所需蛋白质进行分离纯化。抗原、间亲和力一般比较强，其解离常数为108－10?12M，伏马毒素亲和柱价格，所以洗脱时是比较困难的，通常需要较强烈的洗脱条件。可以采取适当的方法如改变抗原、种类或使用类似物等来降低二者的亲和力，以便于洗脱。

另外金黄色球菌蛋白A（ProteinA）能够与球蛋白G（IgG）结合，可以用于分离各种IgG。

亲和柱净化步骤

注意：整个纯化过程尽量不要让柱子干燥!

----3mL柱管取出上方堵头，减去上堵头螺纹下突出部分，插回柱子上，另一端与20mL针筒固定后使用;将1mL柱管上方堵头取出后斜剪断，然后再插回柱子上(柱管内偶见有小气泡属正常现象，赭曲霉亲和柱价格，不影响亲和柱的使用);

----准确移取上述混匀滤液，注入针筒中，调节针筒压力使其以2秒/滴的速度缓慢通过亲和柱;

----用20mL 水冲洗柱子(对于饲料及玉米加工副产品等颜色较深的样液，先用10mL 0.1%吐温20-PBS清洗，再用10 mL 10%水冲洗柱子，之后用10mL水冲洗柱子。)，流速1秒/滴，弃去流出液，直至2~3mL空气通过柱体，保证柱子内没有残余液体;

----准确加入1.5mL(色谱级)洗脱，流速自然重力，直至2~3mL空气通过柱体，保证柱子内没有残余液体。收集全部洗脱液，进行相关测定。

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