高效液相色谱 高效液相色谱 创新通恒公司

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2022-12-09 13:45:08
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高效液相色谱仪的使用保养以及故障处理--使用试管的问题

1、试管的洁净问题。

高效液相色谱分析法是一个很灵敏的分析方法,如果因使用不洁净的试管,便会影响试验结果的准确性。例如,高效液相色谱哪个稳定性好,在用甲醇作溶剂来溶解样品时,所用的小试管是用橡胶塞来做盖子的,因此,高效液相色谱批发价格,在每次进样时,都有一个保留时间固定的干扰峰存在,后经证实,此干扰峰是由甲醇浸泡橡胶塞而溶下的组分所产生,换用玻璃试管后,干扰峰消除。

2、塑料试管的溶解问题。

近年来,一次性塑料试管给试验人员带来了极大的方便,但是,在使用过程中一定要注意有机的溶剂对试管的溶解现象,在利用此种试管提取样品时,有些有的溶剂对管壁有溶解现象,这些被溶解下来的物质有时也能在检测器上产生信号,高效液相色谱,从而干扰样品的测定。这时,可用相同的实验条件先试验一下,看看不含被抽提物时,高效液相色谱报价,提取液在检测器上能否产生干扰信号,如确有干扰信号存在,就只能换用耐有机的溶剂的玻璃试管了。

3、被测样品在试管壁上的吸附问题。






关于色谱柱的使用和维护

色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。

调节流速太快。。。

避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。

反冲色谱柱。。。

一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。

预柱和保护柱。。。

选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。

避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。




HPLC对流动相的一般要求

流动相就比如人体的血液,其质量直接影响到整个系统的正常运行与否。

copy; 应该使用HPLC级的溶剂,不能互相混溶的溶剂不可以直接切换!

copy; 注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的很低波长,低于该波长后,溶剂会有很强的紫外吸收,从而影响极限的稳定性、干扰对所分析物质的检测。

copy; HPLC所使用的水必须是新鲜的和经过0.45μm滤膜过滤过的。建议每天更换新鲜的水。长期不用时,必须把使用水的管路用有机的溶剂置换,防止长霉。

copy; 仪器使用完后要采用适当的溶剂冲洗等方法维护色谱柱和系统。如果使用了缓冲盐一定先将盐要冲洗干净。

copy; 当有流路堵塞时,可以尝试将之反接后冲洗。污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命,并且影响泵和系统的的性能。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液(pH 4 至7) 中尤其如此。




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