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- 2023-01-08 01:42:49
装柱。将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约1/3体积(),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降,层析柱厂家,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用()将其冲入柱中。
压实。沉降完成后,加入更多的,层析柱供应,用双联球或气泵加压,直至流速恒定。柱床约被压缩至9/10体积。无论走常压柱或加压柱,都应进行这一步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。
上样。干法湿法都可以。海沙是没必要的。上样后,加入一些洗脱剂,再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。然后就可以放心地加入大量洗脱剂,而不会冲坏硅胶表面。
过柱和收集。柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。太低的洗脱强度并不好,推荐用梯度洗脱。收集的例子:10mg上样量,1g硅胶H,0.5ml收一馏分;1-2g上样量,50g硅胶(200-300目),20-50ml收一馏分。
检测。要更多地使用喷显剂,如果仅用紫外灯,会损失较多产品,紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。
送谱。收集的产品旋干,层析柱生产商,在送谱前通常需要重结晶。如果样品太少或为液体,可过一小凝胶柱,层析柱,作为送谱前的后纯化手段。可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。
层析的原理
凝胶过滤 凝胶过滤又叫分子筛层析,其原因是凝胶具有网状结构,小分子物质能进入其内部,而大分子物质却被排除在外部。当一混合溶液通过凝胶过滤层析柱时,溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。 四、 亲和层析 亲和层析的原理与众所周知的抗原一、一受体和酶一底物等特异性反应的机理相类似,每对反应物之间都有一定的亲和力。
蛋白层析柱的维护过程将导引元件附接到所述管上; 在不接近所述柱的内部的情况下,松开所述床支承件与所述分配器和所述背垫板; 借助于所述导引元件,在不接近所述柱的内部的情况下,从所述柱上移除所述床支承件对所述柱和/或所述床支承件和/或所述一个或多个密封件进行维护; 从所述管上释放所述导引元件;以及将所述转接器组件降低到所述管内的操作位置,并且将所述转接器组件重新连接到所述管上。