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- 天津龙鼎世纪轻工设备有限公司
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- 发布时间
- 2023-01-09 02:43:44
层析柱的操作方法介绍
1.吸附剂的处理及柱子装填
将一定量薄层层析硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中,于105。C活化2H后,树脂柱生产厂家,取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按一(5:95)比例泵入溶剂,至溶剂流出止。
2.上样
将冬凌草的乙醇提取物400G用适量溶解,泵入中压柱柱头,然后泵入1000RID。
3.洗脱
以一定比例的一为洗脱液,60ML/MIN的流速进行梯度洗脱,柱的使用压力为2~ 3KG/C 。按每份500ML收集,TLC检识展开剂一*仿(2:8),显色剂5%香草醛乙醇液
至洗脱完全,相同流份合并,回收溶剂。将冬凌草甲素流份合并蒸干。加入适量热溶后自然放置,析出结晶,为冬凌草甲素。
普通玻璃层析柱和中压玻璃层析柱的区别及应用领域
sepure普通玻璃层析柱与sepureplus中压玻璃层析柱的区别在于:
1.sepure plus中压玻璃层析柱耐压范围3-6bar,而sepure普通玻璃层析柱耐压范围
1-2bar,两者的材质及厚度均不一样
2.sepure plus中压玻璃层析柱带转换接头(轴向伸缩功能),能给柱内增压和调节填
料层高度,而普通型无此功能,这是两者主要的区别
3、sepure plus中压玻璃层析柱的液体分布系统比普通型更加优化、更加复杂、液体
分布效果更为均匀,进液不会冲击填料层
4、sepure普通玻璃层析柱的直径大到10cm,而sepureplus中压玻璃层析柱的直径
能到20cm、25cm、30cm,一般在蛋白纯化、天然产物有效成分提取、核酸质粒提取、
大分子分离等一类填料非常昂贵的实验,建议使用sepure plus中压玻璃层析柱,因
为sepureplus中压玻璃层析柱装柱方便、分离效果理想,实验能一次成功的几率大很多
事半功倍的不锈钢层析柱使用技巧无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相。因为硅胶中有大量的羟基在外,很容易是样品分解,特别是金属有机化合物和含磷化合物。而氧化铝有碱性、酸性的,长春树脂柱,选择余地比较大,但比硅胶要贵些。听说有个方法,就是用石英做柱子,树脂柱价格,然后用HF254做固定相,这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了,没有验证过。选择吸附剂:200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶。干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml也可以。推荐硅胶量是样品量的30-40倍,具体的选择要具体分析。如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分Rf在0.2-0.4,树脂柱多少钱,杂质相差0.1以上),就可以少用硅胶。用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡。所以如果样品与硅胶的吸附比较强的话,就不容易流出。这样就会发生,后面的点先出,而前面的点后出。这时可以采用氧化铝作固定相。