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- 发布时间
- 2023-01-10 15:41:40
层析柱详细的操作方法是怎样的?
层析柱详细的操作方法:
以中压柱层析法提取分离冬凌草甲素为例
1、吸附剂的处理及柱子装填
将一定量薄层层析硅胶装人搪瓷盘置于烘箱中,于105C活化2H后,取出放置室温即可装柱。柱子采用干法填充,填满整个柱体,不留死体积,密封后用柱塞式计量溶剂泵按一(5:95)比例泵人溶剂,至溶剂流出止。
2、上样
将冬凌草的乙醇提取物400G用适量溶解,泵人中压柱柱头,树脂柱生产商,然后泵人1000RID。
层析柱的应用领域介绍
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。层析柱是层析实验的主体,可根据所要分离的样品的大小、性质决定层析柱的直径尺寸和填充物。
应用领域:
1、植物、中药有效成分地分离。
2、中药有效成分地精制。
3、中药中杂质的清除。
4、化工中间体、合成产品的纯化。
5、蛋白纯化、可以适配AKTA等蛋白纯化仪。
柱层析技术
干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧,至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,再用油泵直接抽,树脂柱厂家,这样就会使得柱子装的很结实。接着是用淋洗剂"走柱子",一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。通常上面加压,树脂柱生产厂家,下面再用油泵抽,这样可以加快速度。干法装柱较方便,但的缺陷在于"走柱子"时,由于溶剂和硅胶之间的吸附放热(可以用手摸柱子明显感觉到),容易产生气泡,这一点在使用低沸点的淋洗剂时如,更为明显。虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉,但是,一旦撤去压力,如在上样、加溶剂等操作的时候,气泡就会释放出来,严重时,整个柱子变花,样品不可能平整地通过,北京树脂柱,当然也就谈不上分离了。解决的办法是:、硅胶一定要天结实;第二、一定要用较多的溶剂"走柱子",一定要到柱子的下端不再发烫,恢复到室温后再撤去压力。