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亲和层析柱装柱注意事项

一文了解亲和层析柱装柱注意事项

1.洗脱

亲和层析的另一个重要的步骤就是要选择合适的条件使待分离物质与配体分开而被洗脱出来。亲和层析的洗脱方法可以分为两种：特异性洗脱和非特异性洗脱。

（1）特异性洗脱

特异性洗脱是指利用洗脱液中的物质与待分离物质或与配体的亲和特性而将待分离物质从亲和吸附剂上洗脱下来。

特异性洗脱也可以分为两种：一种是选择与配体有亲和力的物质进行洗脱，树脂柱价格，另一种是选择与待分离物质有亲和力的物质进行洗脱。前者在洗脱时，树脂柱生产商，选择一种和配体亲和力较强的物质加入洗脱液，这种物质与待分离物质竞争对配体的结合，在适当的条件下，如这种物质与配体的亲和力强或浓度较大，配体就会基本被这种物质占据，原来与配体结合的待分离物质被取代而脱离配体，从而被洗脱下来。

例如用凝集素作为配体分离糖蛋白时，可以用适当的单糖洗脱，鞍山树脂柱，单糖与糖蛋白竞争对凝集素的结合，可以将糖蛋白从凝集素上置换下来。

　　

柱头安装是否合适及是否严密的检查

柱头安装是否合适及是否严密的检查

1、检查下柱头是否按图纸要求安装?（要求按图纸要求安装）

2、检查下柱头内，是否安装了防止吸附剂（例如硅胶）漏出的滤布（或滤网）。

3、所用滤布（滤网）的材质要求能耐所用溶剂的腐蚀，而且孔径很小，一般要求使用500目以上孔径大小的滤布（网）。

4、下柱头安好，紧固后，从柱上端（开口）加入所用洗脱剂中极性较小的一种溶剂（例如已烷、、等），使溶剂液面比下柱头上部分离出20-30厘米，仔细观察下柱头是否漏溶剂。如果漏，则必须坚固（或重装），直至不漏为止。

5、检查确实不漏后，放出柱内溶剂，准备装吸附剂（例如硅胶等）。

层析柱上柱子后压力大怎么办

先试试空白运行，就是不经过柱子光走系统，看看压力是多少，检查是否系统压力过大。

如果系统压力正常，树脂柱厂家，则检查溶液是否澄清，有无沉淀或泛白。

如果溶液没有问题，检查柱头是否堵塞，柱头前的滤膜是否需要清洗。

然后检查下填料是否完整，有无被压碎的填料或者有无杂志吸附在填料上，参照说明书清洗再生下填料。

层析柱压力过大容易压碎填料，需要及时暂停减小压力后继续上柱。

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