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- 2023-04-08 13:31:58
高效液相色谱的历史
1903年俄国植物化学家茨维特(Tswett)初次提出“色谱法”(Chromatography)和“色谱图”(Chromatogram)的概念。茨维特使用色谱法 chromatography (来自希腊字, chroma 意思是颜色, graphy 意思是记录 - 直译为颜色记录)来描述他的彩色试验。(令人好奇的是, 俄罗斯名字茨维特意思是颜色。)1930年以后,高效液相色谱,相继出现了纸色谱、离子交换色谱和薄层色谱等液相色谱技术。1952年,英国学者Martin和Synge 基于他们在分配色谱方面的研究工作,提出了关于气-液分配色谱的比较完整的理论和方法,把色谱技术向前推进了一大步,高效液相色谱哪个牌子好,这是气相色谱在此后的十多年间发展十分迅速的原因。1958年,基于Moore和Stein的工作,高效液相色谱哪家质量好,离子交换色谱的仪器化导致了氨基酸分析仪的出现,这是近代液相色谱的一个重要尝试,但分离效率尚不理想。1960年中后期,气相色谱理论和实践发展,以及机械、光学、电子等技术上的进步,液相色谱又开始活跃。到60年代末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了HPLC。1970年中期以后,微处理机技术用于液相色谱,进一步提高了仪器的自动化水平和分析精度。1990年以后,生物工程和生命科学在国际和国内的迅速发展,为高效液相色谱技术提出了更多、更新的分离、纯化、制备的课题,如人类基因组计划,蛋白质组学有HPLC作预分离等。
液相色谱理论发展简况
色谱法的分离原理是:溶于流动相 (mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationary phase) 发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。 色谱法很早是由植物学家茨维特(Tswett)在1906年研究用碳酸钙分离植物色素时发现的,Tswett用希腊语chroma(色)和graphos(谱)描述他的实验,色谱法(Chromatography)因之得名。后来在此基础上发展出纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法。液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,高效液相色谱批发价格,称为经典液相色谱法,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。
高效液相色谱仪
高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统组成。
1.进样系统
一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作进样量是恒定的。
2.输液系统
该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。
3.分离系统
该系统包括:色谱柱、连接管和恒温器等。
4.检测系统
高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种
5.数据处理系统
该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作,使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。