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- 发布时间
- 2023-04-19 13:59:34
细胞冻存的仪器我们称之为程控速率冷冻仪、程序降温仪、胚胎冷冻仪。是一种、的温变速率可调节的冷冻设备。现已广泛应用于轻工、农业、、基础生物研究等各个领域中,用于淋巴细胞、组织库、细胞、、脐带血库、动植物细胞等的冻存。程控速率冷冻仪的原理:可控的热动力学,为了使细胞的生存能力zui大化,必须小心控制温度的梯度下降。冰晶形成的初始阶段以及凝结阶段都必须严格控制以确保形成*的晶体粒度和形状。拓纷程控速率冷冻仪拥有的封闭性和绝缘性,可以实现对功率和数据参数的恒定管理,可以结合用户的实际体验来确定*的冷冻曲线并且能提供简单的重复性。通过腔室和产品内的两个探针来时刻检测温度并依此调控温度下降梯度。
步骤:(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、,逐滴加入二亚砜 (DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,安徽程序降温仪,置于室温下待用。(3)离心收集培养之细胞,用加的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。(4)取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSOzui后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ ml,细胞程序降温仪,混合均匀,分装于已标示完全之冷冻保存管中,1~2 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,程序降温仪器,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
细胞往往会在温度剧烈变化中。通过使用细胞欣谕程序降温仪,选择合适的冻存液,设定合适的升降温速率,可有效地克服上述不利因素。实践证明,程序降温仪价格,(经温度补尝后)每分钟1-3℃的冷冻速率可大大提高冻存细胞的存活率。传统的生物样本降温通常采用-80℃低温冰箱进行分步骤冷冻,该方法的不足为:耗时长,整个降温过程大约需要一天的时间;在降温过程中需要人为多次转移,给样本的降温带来众多不可控因素,从而导致样本的存活率降低;无法有效地消除结晶过程中释放的潜热,增大了样本的率。