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- 2023-04-26 11:55:50
高效液相色谱
高效液相色谱,又称为“近代柱色谱”,是色谱法的一个重要分支。其所使用的固定相由小颗粒组成,以增加表面积,提高分离速率,因此它被称为高效液相色谱。其原理与柱色谱相似。流动相携带混合物的组分以不同的速度通过色谱柱,其通过的速率取决于组分对流动相和固定相的相对亲和力。通过不同的检测器检测样品中的各组分,液相色谱仪,如紫外可见光检测器、蒸发光散射检测器或示差折光检测器等。大分子(如蛋白质、脂肪)、小分子(如单胺类)以及化学成分相似的物质(如单胺类、类固醇)都可以用高效液相色谱分析。高效液相色谱,应用范围广,应用于法医、食品、临床、环境和生物技术等领域。
多肽的分离制备,如何上量?如何增大分离度?
反相HPLC应当是很好的分离小肽方法,液相色谱仪哪家便宜,用CH3CN或CH3OH:H2O(95:5)做流动相,看保留如何,若无保留,建议改用其他色谱方法进行分离。
关于多肽的分离,首先要知道它的分子量大小,然后选择不同类型的填料,如孔径的大小。我们先在分析柱(4.6mm内径)上做一下实验,找到很大的分离度,这一过程的难度是很大的,要不断地改变流动相和固定相,液相色谱仪哪个生产厂家好,然后再线性或非线性放大到制备,放大的倍数按分析柱的实验结果。分离后可以通过冷冻干燥得到固体。
还可以考虑离子交换来分l离。
纸层析
纸层析,又称纸色谱,液相色谱仪价格,以一种特殊设计的滤纸作为固定相。滤纸中的纤维素层含有的水分作为固定相。缓冲液和其他溶剂用作流动相。分离的原理是相似相溶。纸色谱法可以分析的样品非常广。用毛细管或微量吸管将流动相中溶解的样品标记在滤纸上,然后将滤纸放入容器中,使其浸入溶剂中,于阴暗处进行层析,样品将在滤纸表面分离,然后对其形成的颜色进行识别。纸色谱可以分析碳水化合物、蛋白质、氨基酸、维生素、糖苷、血液和尿液等样品中的代谢物。