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- 发布时间
- 2023-11-01 10:01:32
基因微阵列芯片概述
基因微阵列芯片(Gene microarray chip)是一种高通量基因分析平台,广泛应用于基因表达、基因变异、基因检测和基因组学研究等领域。它是一种以基因序列片段为探针的固相芯片,可同时检测数千到数百万个基因或基因表达产物。
基因微阵列芯片的工作原理基于互补配对的碱基识别原理。芯片表面固定了大量的DNA片段或cDNA片段,这些片段通常是已知的基因序列或表示不同基因的探针序列。待检样品中的RNA或cDNA经过标记后,与芯片上的探针序列进行杂交,形成互补配对。通过检测杂交后标记的信号强度,可以推断出待检样品中各个基因的相对表达水平。
基因微阵列芯片的设计通常基于两种不同的平台:全基因组芯片和定制芯片。全基因组芯片包含了整个基因组的探针,可用于对所有基因进行quan面的分析。定制芯片则是根据研究需求,选择特定的基因或基因组区域设计相应的探针,用于特定的研究目的。
基因微阵列芯片的优势
高通量分析:一块芯片上可以同时检测成千上万个基因,大大提高了研究效率和数据产量。
高灵敏度:通过对标记信号的检测,可以测量基因的表达水平或变异情况,具有较高的灵敏度和jing确性。
多功能性:基因微阵列芯片可以应用于基因表达分析、基因变异检测、基因组分析等多个领域,具有广泛的应用潜力。
数据整合和分析:芯片输出的数据可通过生物信息学方法进行整合和分析,揭示基因间的相互作用、信号通路和功能模式。
2 PDMS芯片制备
PDMS芯片制备采用软光刻技术,从芯片模具(硅模具、SU8模具、PFCT模具、亚克力模具、金属模具)上fu制反向结构,此方法可以容易地fu制特征尺寸小于0.1um的结构,同时,通过等离子体表面处理,PDMS可以和PDMS本身、玻璃、硅进行键合,形成密闭流道。
2.1 配胶
PDMS胶水为双组分,分为A胶和B胶,使用电子秤,配比重量为10:(0.9~1),A胶和B胶的配比越大,胶体凝固后越软。
2.2 匀胶、除泡
将A胶、B胶充分搅拌,PDMS流道,放入真空斧中,真空环境中静止时间约30分钟,待气泡除尽后取出待用。
2.3 浇筑模具
PDMS模塑法可采用的模具有硅模具、SU8模具、Pefect模具、亚克力模具、金属模具,将模具清理干净后,将PDMS浇筑到模具中,放入恒温干燥箱中85℃静置30到40分钟。
2.4 剥胶
模具稍冷却后,将固化后的微流控PDMS芯片与模具分离,注意不用损坏模具、微流控PDMS芯片结构。
2.5 切割
采用zhuan用PDMS芯片切割器或者美工刀,沿着芯片边框进行切割,保持边缘整齐即可。
2.6 打孔
采用PDMS芯片打孔器给微流控PDMS芯片进行打孔,并用胶带纸对微流控PDMS芯片进行清理
2.7 键合
采用等离子清洗机处理衬底(PDMS、玻璃)、PDMS芯片表面,键合功率80~90W,时间20~30s(不同等离子体处理的射频功率和时间长度有所差异),取出后,30s内进行贴合,放置在80度温箱中30分钟左右即可。