西藏自治微流控PDMS芯片 顶旭

基因微阵列芯片的制备方法

探针设计：首先确定研究的基因或基因组区域，然后设计相应的探针序列。探针可以是DNA片段、cDNA片段或寡核苷酸，长度通常为20到70个碱基。

探针合成：将设计好的探针序列进行合成。合成可以通过化学合成方法或基于光掩膜技术的光刻方法进行。

探针标记：为了在芯片上进行检测，探针需要进行标记。标记可以使用荧光染料、fang射性同位素、生物素等不同的方法。标记的选择取决于实验需求和检测平台。

芯片制备：将探针固定在芯片表面上。通常使用玻璃片或硅片作为芯片基底，表面经过特殊处理以提高探针的固定效果。探针可以通过打印、合成或接头的方式固定在芯片上。

打印方法：探针溶液被喷洒、喷射或压印在芯片表面的预定位置上。打印方法可以是喷墨式打印、喷气式打印或机械式打印。

合成方法：探针在芯片表面上进行化学合成，通常采用光刻或微流控技术。光刻方法通过光照和化学反应逐步合成探针。微流控技术通过微型反应池和微流体控制实现探针的合成。

接头方法：探针通过接头分子固定在芯片上。接头分子可以是寡核苷酸、分子链或分子修饰基团。

芯片验证和质控：制备完成的芯片需要进行验证和质控，以确保探针的质量和可靠性。常见的验证方法包括探针序列分析、杂交效率测试和标记信号强度检测。

制备基因微阵列芯片需要专门的设备和技术，常见的芯片制备平台包括Affymetrix、Agilent、Illumina等。此外，制备过程中需要注意探针的选择、标记的稳定性、芯片表面的均匀性和芯片存储条件等因素，以确保芯片的准确性和重复性。

1.3 聚碳酸酯

PC芯片材料聚碳酸酯（PC）是生物医学研究和生物分析一系列微流控应用的shou选耐用材料，包括DNA热循环应用，如聚合酶链式反应（PCR），因为它具有可见光透明度和极高的玻璃化转变温度（145℃）。PC微结构还能够进行样品裂解，病原体检测，扩增子标记，核酸分离和酶促扩增。该聚合物还允许制造多层器件，这使得PC成为基于光刻和PDMS模塑的方案的有效替代。

但PC芯片的制造意味着热压印技术，后续的热键合也需要后续的退火。这种粘合方法不是高质量的粘合，并且必须在高温下对该聚合物进行，这可能会损坏通道的几何形状。

2 PDMS芯片制备

PDMS芯片制备采用软光刻技术，从芯片模具（硅模具、SU8模具、PFCT模具、亚克力模具、金属模具）上fu制反向结构，此方法可以容易地fu制特征尺寸小于0.1um的结构，同时，通过等离子体表面处理，PDMS可以和PDMS本身、玻璃、硅进行键合，形成密闭流道。

2.1 配胶

PDMS胶水为双组分，分为A胶和B胶，使用电子秤，配比重量为10：（0.9~1），A胶和B胶的配比越大，微流控PDMS芯片，胶体凝固后越软。

2.2 匀胶、除泡

将A胶、B胶充分搅拌，放入真空斧中，真空环境中静止时间约30分钟，待气泡除尽后取出待用。

2.3 浇筑模具

PDMS模塑法可采用的模具有硅模具、SU8模具、Pefect模具、亚克力模具、金属模具，将模具清理干净后，将PDMS浇筑到模具中，放入恒温干燥箱中85℃静置30到40分钟。

2.4 剥胶

模具稍冷却后，将固化后的微流控PDMS芯片与模具分离，注意不用损坏模具、微流控PDMS芯片结构。

2.5 切割

采用zhuan用PDMS芯片切割器或者美工刀，沿着芯片边框进行切割，保持边缘整齐即可。

2.6 打孔

采用PDMS芯片打孔器给微流控PDMS芯片进行打孔，并用胶带纸对微流控PDMS芯片进行清理

2.7 键合

采用等离子清洗机处理衬底（PDMS、玻璃）、PDMS芯片表面，键合功率80~90W，时间20~30s（不同等离子体处理的射频功率和时间长度有所差异），取出后，30s内进行贴合，放置在80度温箱中30分钟左右即可。

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