重组蛋白疫苗N端序列分析

重组蛋白疫苗N端序列分析--检测技术服务详情

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重组蛋白疫苗是一类不包含完整病原体，并由异源表达系统中生产的特定蛋白质抗原配制而成的一类疫苗。常见的异源表达系统有：细菌、哺乳动物细胞、植物细胞和昆虫细胞等，往往需要根据所生产的抗原种类选择合适的异源表达系统。重组蛋白疫苗由于其具有安全性好、稳定性强以及成本较低等几大优势，近年来也受到研究者们的广泛青睐。目前，重组蛋白疫苗已被广泛应用于多种传染病，如预防乙型病毒性肝炎（即乙肝）、破伤风、百日咳、流行性感冒等等。重组蛋白疫苗结构的理解对于了解其功能和稳定性至关重要。

重组蛋白疫苗的活性成分为重组蛋白质，这些蛋白质的序列与结构特性直接影响疫苗的免疫原性和效果。N端序列，即蛋白质的氨基末端序列，是重组蛋白质的重要特性之一。对其进行分析可以帮助确认重组蛋白质是否正确地被表达和修饰，因此对于疫苗的质量控制至关重要。目前，N端测序通常使用Edman降解法进行。这种方法是通过连续的化学反应，逐个去除抗体的N端氨基酸，并对每个去除的氨基酸进行识别。这个过程可以重复进行，直到得到足够长的氨基酸序列。然而，这种方法比较耗时，并且需要足够大量的抗体样品。

除了Edman降解法，质谱技术（尤其是串联质谱）也被广泛用于重组蛋白疫苗的氨基酸序列分析，质谱法将抗体蛋白消化成5-25个氨基酸的肽，随即通过LC-MS/MS分析检测，将采集的数据与理论序列数据库进行匹配，进而确认N端序列。质谱可以测出封闭和修饰的重组蛋白疫苗N末端，且已成为shǒu选的全长抗体测序方法。Edman降解法与质谱法不同，其不需要借助蛋白数据库便可以直接进行序列分析。但它不能用于N-末端封闭或修饰后的氨基酸残基。

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