抗体等电点怎么测定

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单克隆抗体（mAbs）的一个重要特征是它们的等电点（pI），其本质上是抗体没有净电荷的pH值，其值取决于抗体所含的带电氨基酸。如果周围环境的pH值低于抗体的pI，则分子携带净正电荷；而当pH值高于pI时，抗体将携带净负电荷。在评估治疗性抗体的药代动力学（PK）特性时，不仅靶向介导的药物处置（TMDD），而且非靶向相关机制也会影响整体PK行为，pI可能是后者的重要因素。此外，由于在产品开发的早期临床前阶段选择zuì佳候选药物可以大大减少开发时间和成本，因此在药物发现和开发过程中考虑去风险策略和工具非常重要，包括抗体可变区域电荷和抗体pI分析。

抗体pI测定方法较多，常见的有沉淀法和经典的等电聚焦电泳法。随着生命科学技术的发展，等电聚焦电泳法也得到了改进，如全柱成像毛细管等电聚焦（icIEF）和压力介导毛细管电泳（PreMCE）等。新开发的一种基于PreMCE改进版本的简单方法，可用于测定具有紧密间隔pKa的两性电解质的等电点。这种新的pI测定PreMCE方法（i）可以在大多数商业毛细管电泳仪器上轻松执行；（ii）它可以使用小的、不纯的样品，（iii）与自然pH梯度中的等电聚焦方法不同，它不需要线性pH梯度，并且（iv）它消除了由于色谱保留在分离室壁上的pI误差。此外，还可以通过振荡法与计算机算法结合进行蛋白等电点的测定，用Visual Basic编写的程序来计算蛋白质和其他带有酸碱性残基的大分子的等电点，理论上可以计算出所需精度的pI值，计算机自动提供蛋白质电荷与pH值的表示，相应的值也可以命令以表格的形式获得。

百泰派克生物科技基于毛细导管等电聚焦（cIEF）提供蛋白等电点的测定一站式技术服务，相比传统平板法，cIEF具有短时高效、jīng确度高、样本用量少等优点。该技术适用于多种氨基酸、多肽、重组蛋白、酶类、单克隆抗体等，并已广泛应用于临床分析，欢迎免费咨询！

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