对多对二硫键位置如何进行鉴定

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2023-12-15 13:11:52
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二硫键是蛋白质肽链内或肽链间两个半胱氨酸残基上巯基的硫原子共价结合形成的,是一种常见的蛋白质翻译后修饰方式。二硫键对蛋白质的正确折叠、定位、稳定性以及生物学功能具有重要意义,在一些蛋白质类药物特别是抗体药物中,二硫键更是决定其质量的关键属性。不同的蛋白质中二硫键的数目和所处的位置都是不同的,有些蛋白质没有二硫键结构,有些蛋白有且不止有一个二硫键结构,这些差异有助于形成蛋白质多样性。

目前,常见的二硫键鉴定技术主要包括核磁共振法、X射线晶体法、对角纸电泳法以及液相色谱串联质谱法等,基于质谱的鉴定技术已经成为表征二硫键的主要分析工具。利用液相色谱串联质谱法分析蛋白单个二硫键或多对二硫键在原理上没有不同,都包括蛋白酶切、肽段分离、质谱检测、数据比较分析等步骤,大致流程为将蛋白质进行酶切并利用色谱技术对肽段进行分离和收集,再通过串联质谱检测获得肽段的分子量以及肽段的氨基酸序列,zuì后比较还原性与非还原性蛋白的肽段分子量和氨基酸序列,找出差异片段,以确定二硫键的位置。

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的质谱平台,结合Nano-LC纳升色谱,提供高效精准的蛋白二硫键鉴定和定量分析服务技术包裹,您只需要将您的实验目的告诉我们并将您的样品寄给我们,我们会负责项目后续所有事宜,提供蛋白二硫键位点的相关信息,欢迎免费咨询。


百泰派克生物科技-生物药物表征,生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。

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