抑菌环试验，WS/T 650-2019-方检检测

抑菌环试验是一种利用抑菌剂不断溶解经琼脂扩散形成不同浓度梯度，以显示其抑菌作用的试验方法。该试验适用于抑菌剂与溶出性抗（抑）菌产品的鉴定。

具体而言，抑菌环试验的步骤包括：

准备工具和材料：金黄色葡萄球菌（ATCC 6538）、大肠杆菌（8099）、白色念珠菌（ATCC 10231）菌悬液、抑菌剂载体、无菌干燥滤纸片、无菌棉拭子、无菌镊子、游标卡尺等。

制备试验菌：用无菌棉拭子蘸取浓度为5×105cfu/mL∼5×106cfu/mL的试验菌悬液，在营养琼脂培养基平板表面均匀涂抹3次。每涂抹1次，平板应转动6°，最后将棉拭子绕平板边缘涂抹一周。盖好平皿，置室温干燥5min。

制备抑菌剂样片：取无菌干燥滤纸片，滴加抑菌剂溶液20uL，平放于清洁的无菌平皿内，置温箱（37℃）中烤干后备用。

贴放样片：用无菌镊子取样片贴放于平板表面，各样片中心之间相距25mm以上，与平板的周缘相距15mm以上。贴放好后，用无菌镊子轻压样片，使其紧贴于平板表面。盖好玻璃皿，置于37℃恒温箱中，培养24h后观察结果。

测量抑菌环直径：用游标卡尺测量抑菌环的直径并记录。试验重复3次。

通过比较抑菌环的大小，可以判断抑菌剂的抑菌能力。该试验方法操作便捷、简单易行、成本低廉、结果准确可靠，是抑菌试验的经典方法，被广泛使用。