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- 2026-07-17 16:13:18
外泌体（Exosome）是一种由细胞分泌的膜性囊泡小体，其直径通常为30-100 nm，比其它的一些囊泡（凋亡小体）要小得多。外泌体广泛存在于各种体液中，可携带蛋白质、脂类、核酸（miRNAs，ncRNAs）等多种生物功能大分子。新的外泌体形成了一种特殊的细胞间信息传递系统，它不仅影响细胞的生理状态，还与多种疾病的发生与发展密切相关。外泌体领域的研究已经在癌症的诊断及治疗等领域发挥重要作用，基于质谱的高通量蛋白质组学是研究外泌体的一项技术手段。
质谱技术可以用于研究外泌体中的成分：蛋白质，脂类和小分子化合物。而利用蛋白质质谱技术，我们可以鉴定外泌体中的蛋白组成并对蛋白进行定量分析。
仪器设备Thermo Scientific Orbitrap Astral
Bruker timsTOF Pro2/HT
Bruker timsTOF Pro
Thermo Scientific Orbitrap Exploris 480
Thermo Scientific HF-X
Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos
Thermo Scientific Plus
Thermo Scientific Orbitrap Fusion
Thermo Scientific
技术优势拥有10X Proteomics、4D-FastDIA、4D-Label free、SILAC、TMT/iTRAQ三种技术研究外泌体定量蛋白质组。
10X Proteomics的方法能够以高通量实现高深度定量结果。可在一天内分析>100样本中的100+万个蛋白质组，扫描速度、分辨率、检测灵敏度比传统方法高10倍；
4D-FastDIA的方法延续了4D蛋白组无需肽段分级和高深度的特征，进一步结合4D-DIA策略，降低缺失值，提高定量的稳定性与平行性，尤其适用于大规模蛋白质组学定量分析；
Label free的方法无需同位素标记试剂，并且不受样本条件的限制，但准确性会受到质谱重复性等因素的影响；
SILAC技术属于体内标记技术，标记效果稳定，标记效率高达99%，并不受裂解液成分的影响；
TMT/iTRAQ属于体外标记技术，标记灵敏度高，重复性好，覆盖度高。且TMT标记平行比较多达10个样品！
应用领域案例一 肿瘤转移: 外核体的特殊靶标或可预测癌症的转移走向
Tumor exosome integrins determine organotropic metastasis.Nature.
1. 示踪实验证实，具有特定转移倾向的肿瘤细胞来源的外泌体，优先被定居细胞摄取；
2. 肿瘤细胞在转移前先释放外泌体，外泌体到达预期转移器官后会被相应的细胞摄取，进而改变这些靶细胞的状态；
3. 利用定量蛋白质组学技术，发现外泌体表面的整合素类蛋白质在转移过程中发挥着重要的作用，并决定着靶器官的特异性。如整合素α6 β4 和α6 β1与肺部的转移有关整合素αv β5则与肝脏的转移相关。
案例二 免疫调控: 布氏锥虫通过细胞外囊泡传递毒力因子而引起宿主贫血症
Extracellular vesicles from Trypanosoma brucei ediate virulence factor transfer and cause host anemia.Cell.
1. 锥虫的鞭毛膜产生膜纳米管并分解成游离的胞外小泡。致病锥虫通过外泌体传递毒力因子，对人体先天免疫产生抗性；
2. 锥虫细胞外囊泡还可以与哺乳动物的红细胞融合，造成红细胞被迅速清除，从而导致贫血。这些锥虫细胞外囊泡是一种细胞器，可介导非遗传性毒力因子的转移，使宿主红细胞重构，从而导致贫血。
案例三 植物外泌体: 外泌体蛋白参与植物对病原菌侵染的相应
Extracellular vesicles isolated from the leaf apoplast carry stress-response proteins.Plant Physiol.
1. 研究者采用不连续对的密度梯度离心从GFP-PEN1转基因植株叶片中分离了胞外囊泡（EVs），利用质谱技术从EVs中鉴定到598个蛋白。将鉴定的蛋白进行基因注释，结果表明有26%的蛋白属于植物应对生物胁迫和非生物胁迫蛋白；
2. 拟南芥经假单胞杆菌侵染或用御敌激素水杨酸处理后，植物产生的外泌体数量增加了2倍，表明拟南芥胞外囊泡参与了植物对生物胁迫的响应Tumor exosome integrins determine organotropic metastasis.Nature.