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- 2026-08-21 08:32:02
GB/T 《实验动物 支气管鲍特杆菌检测方法》标准检测解析
一、标准基本信息标准编号:GB/T
发布日期:2001年8月29日
实施日期:2002年5月1日
主管部门:科学技术部
归口单位:全国实验动物标准化技术委员会(TC281)
起草单位:中国实验动物学会
标准状态:现行有效(最近一次复审于2023年12月28日,为继续有效)
替代标准:全部代替GB/T
二、标准适用范围本标准适用于大鼠、豚鼠和兔支气管鲍特杆菌的检测。
三、检测方法概述支气管鲍特杆菌为革兰阴性小杆菌,寄居于大鼠、豚鼠和家兔的上呼吸道。该菌具有特定的生化反应及溶血能力,其菌体可与相应的免疫血清在玻片上产生肉眼可见的凝集反应。据此可对该菌进行分离培养和检测。检测方法主要包括样本采集、分离培养、生化鉴定及血清学检测等步骤。
四、检测方法详解样本采集
采集部位:呼吸道分泌物或病料。
采集原则:严格无菌操作,避免交叉污染。样本量要足够,且具有代表性。
保存与运输:样本采集后应尽快送实验室检测。保存时可用合适保存液,低温保存防变质。运输过程中保持适宜温度、湿度,避免震荡、挤压。
分离培养
培养基选择:使用血琼脂平皿和DHL琼脂平皿进行分离培养。
培养条件:将接种后的培养基置于37℃培养24-48小时,观察菌落特征。
菌落特征:支气管鲍特杆菌在血琼脂平皿上形成1mm左右、灰白色且带有轻微α溶血的菌落;在DHL琼脂平皿上可形成2mm左右、无色半透明的菌落。
生化鉴定
双糖铁或三糖铁培养基上不利用碳水化合物,不产酸不产气,呈碱性反应。
硫化氢试验阴性。
尿素酶试验阳性。
硝酸盐试验阴性。
靛基质试验阴性。
半固体动力试验阳性。
糖发酵试验阴性。
鉴定项目:包括菌体形态、生化反应等。
菌体形态:革兰阴性小杆菌,两端钝圆并浓染。
生化反应:
血清学检测
检测方法:玻片凝集试验。
操作步骤:取纯化菌液与支气管鲍特杆菌阳性血清混合,2分钟内出现肉眼可见凝集为阳性。
注意事项:血清学方法易与其他巴斯德科菌属产生交叉反应,需结合生化鉴定结果进行综合判断。
五、结果判定阳性报告:凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告。
阴性报告:不符合者作出阴性报告。