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- 2019-12-05 05:45:00
广州劢博仪器有限公司产品服务包括：非洲猪瘟病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、猪瘟检测、非洲猪瘟检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲猪瘟病毒快速检测试剂盒。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。
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如果检测到荧光信号超过域值被认为是真正的信号，它可用于定义样本的域值循环数（Ct）。Ct值的含义是：每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。研究表明，每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，因此只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。
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扩增序列特异性检测方法是在PCR反应中利用标记荧光染料的基因特异寡核苷酸探针来检测产物，它又可分为直接法和间接法。间接的方法就是利用水解探针的策略。目前在-PCR中最广泛使用的TaqMan系统就是运用了这个原理。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团，此时5′端荧光基团吸收能量后将能量转移给临近的3′端荧光淬灭基团（发生荧光共振能量转移，FRET），因此探针完整时，检测不到该探针5′端荧光基团发出的荧光。
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非洲猪瘟为何难以控制？非洲猪瘟病毒基因组全长 170～190 kb，为有囊膜的双链 DNA 病毒，病毒粒子大小为 175～215 nm，呈正二十面体结构，也是唯i一的虫媒DNA病毒。非洲猪瘟病毒是一种急性、热性、高度接触性传i染病，引起猪的死i亡率可达100％，并且非洲猪瘟具有潜伏期，即使感i染病毒，但没有临床症状，就有可能通过非实验室检验技术关卡流入市场，进而导致下游食品企业相关问题的出现。
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非洲猪瘟与传统猪瘟相似且综合症状复杂难辨，临床上类似于急性猪瘟，表现为高热、皮肤充血、流i产、水肿和脏器出血。我国因之前不属于非洲猪瘟i疫情国家，因此没有相关的针对性研究，目前采用的是原农i业部检疫所于1997年与美国梅岛动物病研究所共同研究的检测方法，主要是PCR和ELISA，标准遵循GB/T 非洲猪瘟诊断技术。随着相关检测技术的发展，食品加工公司荧光定量PCR，对于非洲猪瘟的检测方法也更加完善。PCR技术是目前最i简单、快速的分子学检测方法，但该方法的敏感性有限，因此以PCR为基础的更新方法应运而生。
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定量PCR已经从基于凝胶的低通量分析发展到高通量的荧光分析技术，即实时定量PCR。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。实时定量PCR (real-time PCR)是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量，荧光定量PCR经销，不需要取出PCR产物进行分离。
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PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，荧光定量PCR，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步.