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- 2020-04-18 15:07:34
琼脂糖凝胶电泳原理
琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物。将琼脂糖在所需缓冲液中加热熔化成清澈、透明的溶胶，然后倒入胶模中，凝固后将形成一种固体基质，其密度取决于琼脂糖的浓度。
将凝胶置电场中，在中性pH值下带电荷的核酸通过凝胶网孔向阳极迁移，迁移速率受到核酸的分子大小、构象、琼脂糖浓度、所加电压、电场、电泳缓冲液、嵌入染料的量等因素影响。在不同条件下电泳适当时间后，大小、构象不同的核酸片段将处在凝胶不同位置上，从而达到分离的目的。琼脂糖凝胶的分离范围较广，用各种浓度的琼脂糖凝胶可分离长度为200bp至50kb的DNA。
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电泳槽的使用方法
以下内容由龙方科技为您提供，希望对同行业的朋友有所帮助。
1、 将凝胶密封条框放在平板上，然后将凹型玻璃板与平板玻璃重叠
2、 将两块玻璃立起来使其底端接触桌面，用手将两块玻璃板夹住放入电泳槽内，然后插入斜楔板（直面对玻璃，斜面对槽）到适中程度，即可灌胶
3、凝胶凝结后，轻轻取下梳子
4、用手夹住两块玻璃板，小型转印电泳槽生产厂家，上提斜楔板，使其松开，然后取下玻璃胶室去掉凝胶密封框，注意在上述过程中手始终给玻璃胶室一个压紧力，再将玻璃胶室凹面朝里置入电泳槽，插入斜楔板，将缓冲液加至内槽玻璃凹口以上，外槽缓冲液加到距玻璃上沿3mm处即可电泳，注意避免在胶室下端出现气泡
5、加样时可用加样器斜靠在提手边缘的凹槽内，以准确定位加样位置。盖好上盖，在电压150伏以下进行电泳分离，根据指示剂位置确定电泳时间。电泳结束后，山东小型转印电泳槽，关掉电源按住本体提手打开上盖，小型转印电泳槽公司，拔掉固定板，取出玻璃板，用刀片或薄板轻轻将玻璃夹层分开。本电泳槽同时可进行双板电泳，如果只跑一块胶时，需要在另外一侧用单胶替代板代替玻璃。
核酸电泳凝胶的制备和电泳步骤
操作方法如下:
(1) 根据所需要的凝胶的大小将相应的凝胶托盘按正确位置放置在制胶器内;
(2) 称取适量琼脂糖，小型转印电泳槽厂家，置电泳缓冲液中，加热使琼脂糖溶解;
(3) 待溶液冷至60℃，加入10mg/ml EB贮存液，使终浓度达0.5mg/ml;
(4) 在距离胶模底板0.5-1mm处放置电泳梳，将琼脂糖溶液倒入胶模中，厚度约3-5mm，注意避免产生气泡;
(5) 凝胶完全凝固后，移去梳子和透明胶，将凝胶放入电泳槽。加入TBE缓冲液使恰好没过胶面约1mm;
(6) 将DNA样品与1/6体积加样缓冲液混合后，加入样品槽中;
(7) 接通电源，使样品槽在负极端，用1-5v/cm的电压，电泳适当时间;
(8) 电泳结束后，可将含EB的凝胶直接放在紫外线检测仪上观察，并拍照记录，也可将不含EB的凝胶在0.5μg/ml的EB溶液中染色30-45分钟，再如上观察和拍照，记录结果。