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- 2020-05-04 18:32:34
胶冻样类芽孢杆菌的检测方法
胶冻样类芽孢杆菌作为微生物肥料产品中的重要功能菌,如何准确快速鉴别对优良菌株筛选和产品检测至关重要。
1、形态检测或者生理生化检测
常用的检测方法是根据检测的形态学或生理生化特征进行初步判断,胶冻样类芽孢杆菌供货商,然而,胶冻样类芽孢杆菌与土壤类芽孢杆菌(P. edaphicus)是近源菌,两者具有极其相似的菌体形态和菌落特征,生理生化性质也很相近,因此用传统的微生物检测方法很难将两者分开。
2、DNA测序检测
基于16SrDNA、gyrB基因等保守序列的系统发育学分析方法能够准确地鉴定胶冻样类芽孢杆菌,但需要大量测序,胶冻样类芽孢杆菌经销商,过程繁琐且花费较高,在大批量菌株的鉴定中并不适用。
3、 PCR检测
特异PCR检测技术具有特异性强、敏感度高、快速灵敏的优点,利用该技术进行胶冻样类芽孢杆菌的分类鉴定比起其他的检测方法更加简便省时,并且避免了大量测序,节省检测成本。
HB-02菌株在20 m3发酵罐发酵到终点的发酵液采用式离心机进行浓缩处理,为下一步发酵液的喷雾干燥处理提供准备。
设定喷雾干燥塔进风温度分别为110、130、150和170 ℃,干燥后进行芽孢收率的测定,进而确定胶冻样类芽孢杆菌喷雾干燥理想的进风温度。
设定喷雾干燥塔的通风量分别为10、15、20和25 m3/min,干燥后进行芽孢收率的测定,进而确定胶冻样类芽孢杆菌喷雾干燥适宜的通风量。
设定喷雾干燥塔的进料速率分别为0.50、0.75和1.00 t/h,干燥后进行芽孢收率的测定,进而确定胶冻样类芽孢杆菌喷雾干燥较为理想的进料速率。采用20m3发酵罐进行了3批次试验,装料体积占发酵罐总容积65%。发酵结束后,首先进行离心浓缩,然后加入填充剂,再进行喷雾干燥,后测定其芽孢收率及有效活菌数。
将市购氮肥、磷肥、钾肥按一定质量比与草炭及保护剂混合后,得到不同N、P2O5、K2O含量及有机质含量的有机―无机混合物,胶冻样类芽孢杆菌厂,然后加入40.0 g高含量胶冻样类芽孢杆菌HB-02菌株菌粉(50.0×108 cfu/g),制成不同N-P2O5-K2O含量的复合微生物肥料。试验共设T1~T5 5个处理,每个处理样品质量为500.0 g,胶冻样类芽孢杆菌,3次重复,分别装入无菌聚袋中密封常温保存,在不同时间取样测定胶冻样类芽孢杆菌的有效活菌数。