保留时间变化可能的原因:解决方法.柱温变化:柱恒温.等度与梯度间未能充分平衡:至少用倍柱体积的流动相平衡柱.缓冲液容量不够:用mmol/L的缓冲液.柱污染:每天冲洗柱.柱内条件变化:稳定进样条件,调节流动相.柱快达到寿命:采用保护柱保留时间缩短可能的原因:解决方法.流速增加:检查泵,重新设定流速.样品超载:降低样品量.键合相流失:流动相PH值保持在~.检查柱的方向.流动相组成变化:防止流动相蒸发或沉淀.温度增加:柱恒温保留时间延长可能的原因:解决方法.流速下降:管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡.硅胶柱上活性点变化:用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱.键合相流失:同前.流动相组成变化:同前.温度降低:同前出现肩峰或分叉可能的原因:解决方法.样品体积过大:用流动相配样,总的样品体积小于峰的%.样品溶剂过强:采用较弱的样品溶剂.柱塌陷或形成短路通道:更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件.柱内烧结不锈钢失效:更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品.进样器损坏:更换进样器转子基线噪声可能的原因:解决方法.气泡(尖锐峰):流动相脱气,加柱后背压.污染(随机噪声):清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂.检测器灯连续噪声:更换氘灯.电干扰(偶然噪声):采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等).检测器中有气泡:流动相脱气,加柱后背压鬼峰可能的原因:解决方法.进样阀残余峰:每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗.样品中未知物:处理样品.柱未平衡:重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱).三(TFA)氧化(肽谱):每天新配,用抗氧化剂.水污染(反相):通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水。