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- 发布时间
- 2020-10-28 23:31:23
通过鸟苷酸环化酶可以实现GTP转化为cGMP。在哺乳动物中,存在2种类型的鸟苷酸环化酶:可溶性及膜结合的鸟苷酸 环化酶(8,10,11)。可溶性环化酶在一氧化氮与血红素辅基结合后,即被激l活。七层膜结合鸟苷酸环化酶(即跨膜鸟苷酸环化酶或鸟苷酸环化酶微粒)已被证实存在于人类基因组中,cGMP antibody,鸟苷酸环化酶A和B是利l尿钠肽受体,鸟苷酸环化酶C能被热稳定细菌肠毒l素、鸟苷素和脲激l活。跨膜鸟苷酸环化酶的活性亦受胞内信号通路的其他受体信号所调控。
目前商业化提供的一些cGMP检测试剂盒主要使用的是非亲和纯化的cGMP多克l隆抗l体。尽管据称有特异性,但这些多克l隆抗cGMP抗l体与cAMP和GTP呈现一定程度的交叉反应。且在大多数细胞类型中,cGMP含量低于cAMP 100倍。
组织样本需预先冰冻于液氮中。在不锈钢研钵中用液氮将组子样本研磨成精细粉末。待液氮挥发完后,称量冰冻组织样本并加入10倍体积的0.1M HCl混匀。室温以大于600g离心力离心,取上层清夜用0.1M HCl稀释至适当浓度。