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- 2021-04-28 17:35:08
微生物细胞培养
微生物多为单细胞生物,生存条件比较简单。所以微生物人工培养的条件比动植物细胞简单得多。其中厌氧微生物培养比好氧微生物复杂,因为严格厌氧需要维持二氧化碳等非氧的惰性气体浓度,而好氧微生物则只需要通过不断搅拌提供无菌氧气。微生物对培养条件要求不如动植物细胞那样苛刻,玉米浆、蛋白胨、麦芽汁、酵母膏等成为良好的微生物天然培养基。对于一些特殊微生物的营养条件要求,可以在这些天然培养基的基础上额外添加。
iPS细胞
基本概念:诱导多能iPS细胞(induced pluripotent stem cells, iPS cells )起初是日本人山中申弥( ShinyaYamanaka)于2006年利用病毒载体将四个转录因子(Oct4,人iPS细胞相关, Sox2, KIf4和c-Myc)的组合转入分化的体细胞中,使其重编程而得到的类似胚胎iPS细胞的一种细胞类型。随后世界各地不同科学家陆续发现其他方法同样也可以制造这种细胞。
细胞可分为全能iPS细胞、多能iPS细胞和单能iPS细胞,诱导多能iPS细胞即通过向体细胞幄入诱.导基因,使体细胞重编程获得具有胚胎iPS细胞样特性的多能iPS细胞,也称为去分化。
细胞复苏
将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。
加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2的细胞培养箱中培养。