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检测技术服务:N-糖样品制备和分析

发布时间:2023-12-14 06:22  点击:7次

检测技术服务:N-糖样品制备和分析--检测技术服务详情

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在开始基于质谱的N-糖检测之前,需要进行N-糖样品制备和分析,主要包括糖蛋白富集、N-糖释放与标记、N-糖衍生化等内容。

糖蛋白富集:由于正常生理情况下糖基化蛋白的丰度较低,因此需要对N-糖基化修饰蛋白(即糖蛋白)进行富集,富集方法主要包括凝集素富集、硼酸亲和富集、亲水色谱HILIC富集和肼化学富集等。其中HILIC富集应用比较多,HILIC富集采用极性固定相和非极性流动相的色谱技术,利用糖肽和糖链的亲水性进行分离。

N-糖释放与标记:糖蛋白酶切通常使用PNGase(肽-N-糖苷酶)对糖肽进行酶促去糖基化,PNGase是一种切割N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)与天冬氨酸(Asn)残基之间的键的酶,并通过同位素标记进行定量。

N-糖衍生化:释放的N-糖通过2-氨基苯甲酰胺(2-AB)等物质进行衍生化处理,经过以上衍生化的N-糖样品才可用于基质辅助激光解吸-飞行时间质谱(MALDI TOF MS)上机分析。

百泰派克生物科技采用MALDI TOF MS高分辨质谱系统和UHPLC技术提供N-糖分析服务,该服务可用于鉴定血浆/血清、细胞、组织或生物体表达的全部N-糖,所有与蛋白质连接的聚糖都将通过酶消化水解,通过亲水色谱法分离后,使用质谱系统进行定量分析。您只需将实验目的告知并将样品寄出,我们将负责项目后续所有事宜,包括蛋白提取、蛋白酶切、肽段分离、质谱分析、质谱原始数据分析、生物信息学分析。


百泰派克生物科技-生物药物表征,生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。


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