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- 苏州博特龙免疫技术有限公司
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- 发布时间
- 2022-09-25 17:22:39
se5W (5周标准鼠单抗/多抗制备佐剂)
se5W用途
通过5周2针的标准免0疫程序制备小鼠单克0隆和多克0隆抗0体,ELISA滴度(Cutoff值为0.1000)可达到1:10000-1:10000000。
se5W使用方法(详见使用说明书)
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度(按每针次50μl用量配制)。
备注:推荐使用的抗原用量为
(1)免0疫原性较强的灭活全病毒或全细菌以及病毒样颗粒抗原每针次1-5μg;
(2)免0疫原性较弱的亚单位蛋白抗原每针次5-20μg;
(3)偶联了载体蛋白的小分子抗原每针次20-50μg。
2. 充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1迅速混匀。
备注:本佐剂产生沉淀属正常现象,与抗原混合操作越快越好。
【摘要】 目的建立一种快速制备甲胎蛋白单克0隆抗0体(AFP—McAb)杂交瘤细胞系的方法。 方法 以常规和改良两
种方式同时免0疫8~12周Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨0髓瘤细胞SP2/0融合并行次黄piao呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养。
用间接酶链免0疫吸附试验法(EI。ISA)筛选阳性克0隆株,benzonase,并建立细胞系。 结果 在较短时间内,改良法能获得高0效价的免0疫
抗0体,与常规免0疫法相比有极显著差异(Plt;0.001),同时改良法的细胞融合率和抗0体阳性率也显著高于常规免0疫法
(Plt;o.001)。筛选获得的高0效分泌抗人AFP—McAb的阳性杂交瘤细胞珠进行了初步鉴定。 结论 新的改良方法优化了
常规的McAb制备中动物免0疫程序,并能成功筛选出AFP—McAb杂交瘤细胞系。
抗果蝇 MRJ 蛋白单克0隆抗0体的制备和鉴定
摘要: 制备抗 果 蝇 MRJ 蛋白单克0隆抗0体可用于研究果蝇 mrj 的 生 物 学 功 能,使 用 IPTG 诱 导 重 组 质 粒pET28a-mrj 在大肠杆0菌 Rosetta 中表达,重组蛋白经过 Ni-IDA 凝胶柱亲和纯化后免0疫 BALB/c 小鼠。然后取免0疫好的小鼠的脾0脏细胞与小鼠骨0髓瘤细胞 SP2 /0 融合,经克0隆和筛选获得了能分泌抗果蝇 MRJ 蛋白单克0隆抗0体的杂交瘤细胞株。腹0水制备后获得单克0隆抗0体,通过 ELISA 和 Western Blot 对所获得的抗0体进行鉴定,结果表明所制备单克0隆抗0体能够特异性结合于原核及真核细胞表达的 MRJ 蛋白,可用于研究 mrj 基因的生物学功能。
关键词: mrj; 细胞融合; 单克0隆抗0体