脂质体转染试剂 苏州博特龙

以高分子聚合物为载体的基因传递技术正成为人们研究的方向。但应用的阳离子聚合物转染试剂，仍然存在转染效率不高和细胞毒性的问题。zui新的高分子聚合物转染试剂是纳米聚合物转染试剂，由于采用新技术和新材料，具有高0效、安全、低细胞毒性。其原理是：分子内含有许多氨基，在生理PH下会发生质子化，这些质子化的氨基可以中和DNA质粒表面的负电荷，使DNA分子由伸展结构压缩为体积相对较小的DNA粒子，并包裹在其中，使DNA免受核酸酶的降解。转染复合物主要是通过细胞内吞作用将DNA转移进入细胞，形成内含体(endosome)，DNA从内含体释放，进入细胞质中，再进一步进入核内转录、表达。通过纳米技术生产出的转染试剂在纳米尺度表现出结合保护DNA能力强、毒性低的独0特性能。

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博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类齐全的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。

使用方法

1. 将新鲜消化的 BHK-21 细胞接种到 24 孔细胞板中，每孔 1~2×105细胞，1ml 完全培养基。备注：可在生长旺盛的细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染，无需 18~24 小时的等候时间。

2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染试剂分别稀释到 50μl 生理盐水中。备注：质粒 DNA 和转染试剂的zui适用量需要根据不同培养基来优化，但理论上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范围。

3. 合并上述两溶液并混匀。备注：无需其它转染试剂所需的 10~30 分钟的等候时间。

4. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中，用加样器吸打混匀。备注：转染复合物可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染。

5. 将细胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中进行培养。备注：无需在转染后 4~6 小时补加血0清或更换培养基。

6. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。

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注意事项：

1. 质粒 DNA：请用能够去除内毒0素的方法制备高质量的质粒 DNA。

2. 稀释液：0.85%（W/V）生理盐水，用低内毒0素纯水配制，脂质体转染试剂，高压消毒或除0菌过滤。

3. 培养基：经过 DMEM、RPMI-1640 和 M199 等常规培养基测试，推荐使用含 5~10%牛血0清的DMEM，若转染效果不理想可尝试其它培养基。

4. 以 24 孔细胞板转染实验为例，推荐每孔低内毒0素质粒 DNA 用量为 2μg、转染试剂用量为 3~5μl，请在正式实验前根据不同培养基用报告基因进行优化。

5. 立传立转要求使用生长旺盛的细胞，即细胞生长至 80-90%成片或刚长满。若使用生长过老的细胞，将明显影响立传立转的效率。

6. 立传立转对细胞状态要求较高，如果转染效果不理想，可按 nced 的转染方法（见本说明书第 4 页），在细胞贴壁后进行标准转染操作。

脂质体转染试剂-苏州博特龙(图)由苏州博特龙免疫技术有限公司提供。“二抗,HRP,Biotin,FITC,AU,PE”选择苏州博特龙免疫技术有限公司，公司位于：江苏省苏州市相城开发区观塘路1号西交大漕湖科技园C幢810，多年来，博特龙坚持为客户提供好的服务，联系人：刘总。欢迎广大新老客户来电，来函，亲临指导，洽谈业务。博特龙期待成为您的长期合作伙伴！