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- 苏州博特龙免疫技术有限公司
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- 发布时间
- 2022-10-21 11:09:17
过度染色
1. 没有有效封闭内源性过氧化物酶。
2. 不完全脱蜡。
3. 过度组织粘附。
4. 一抗稀释度不当。
5. 蛋白质非特异性结合。
不染色
1. 忘记加一抗、生物素化二抗或亲合素-HRP。
2. 处理过程中抗原破坏。
3. 固定不当。
4. 用含叠氮钠洗涤液。
5. 操作过程中样品彻0底干燥。
6. 未按操作程序操作。
染色较弱
1. 加免0疫试剂前没有将洗涤液去掉。
2. 抗0体稀释不当。
3. 显色前底物放置时间过长。
4. 过氧0化氢的破坏作用。
生物素-酪胺信号放大试剂盒(HRP底物) 酪胺信号放大技术(TSA, Tyramide signal amplification)主要原理是,在过氧0化氢存在情况下,标记在抗0体上的HRP将底物酪胺活化,后者与相邻的蛋白上的酪氨酸残基生成稳定的共价结合,因此这些蛋白(如HRP、抗0体)上会富集大量带有生物素标记的酪胺,使信号被有效放大。生物素为小分子化合物,分子量244。亲和素与生物素有极高的亲和力,结合牢固,而且特异性高,每个亲和素可结合4个生物素。用小分子生物素与HRP酶标记的亲和素发生特异性反应,可减小抗原抗0体反应的空间位阻,使反应明显放大。