上海表面羟基化 表面羟基化原理 贝蒂克生物

目前已有多种方法可以将寡核苷酸或短肽固定到固相支持物上。这些方法总体上有两种，即原位合成（ in situ synthesis ）与合成点样两种。支持物有多种如玻璃片、硅片、聚膜、纤维素膜、尼龙膜等，但需经特殊处理。作原位合成的支持物在聚合反应前要先使其表面衍生出羟基或氨基（视所要固定基因芯片的分子为核酸或寡肽而定）并与保护基建立共价连接；作点样用的支持物为使其表面带上正电荷以吸附带负电荷的探针分子，通常需包被以氨基硅烷或多聚赖氨酸等。

微阵列芯片应用流程

1）制备靶点

从生物标本中提取核苷酸并进行标记；

（2）杂交

让靶点与芯片上的cDNA或寡核苷酸序列进行孵育；

（3）获取数据

扫描与探针杂交的靶点表现出来的信号强度

（4）数据分析

从大量数据中得出具有生物学意义的结论

微阵列芯片技术通过测定能够与探针杂交的mRNA的数量，表面羟基化原理，反映表达此mRNA的基因的转录情况，芯片的构建首先要根据研究的需要选择基因及相应的探针，上海表面羟基化，其次是从标本中提取mRNA，并制备出靶点，然后将靶点加入芯片，进行孵育杂交、冲洗掉没有杂交的样品以及扫描等操作，得到原始数据，再将这些数据进行标准化和统计分析后得到结论，构造适当的微阵列芯片是开展后续研究的基础。

防脱片的成分为载玻片(盖玻片)、玻片修饰剂(黏附剂)，常用的黏附剂有APES(3-Aminopropyl-Triethoxysilane 3-氨丙基-3-乙氧基)、多聚-L-赖氨酸(Poly-L-Lysine)、明胶、蛋清等。细胞学常用黏附剂为APES和多聚-L-赖氨酸 ，组织学常用明胶、蛋清等。

一、载玻片和盖玻片的处理

将载玻片或培养用的小盖片浸泡在清洁液中24小时，如何表面羟基化，然后流水充分冲洗，表面羟基化过程，再用蒸馏水冲洗3遍以上，而后置95%乙醇中12小时。取出擦干或烤干，贮放于玻片盒内备用。盖玻片很薄，以上处理程序必须缩短时间，清洁液浸泡只需2小时，流水冲洗注意勿损伤玻片。

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