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- 发布时间
- 2022-10-27 03:50:12
高效液相色谱基线漂移的原因
(1)柱的温度波动。即使是微小的温度变化也会导致基线波动。通常影响差异检测器、电导检测器、UV检测器或其它光电类检测器的较低灵敏度。
(2)高效色谱流动相不均匀流动相条件变化,引起的基线漂移大于温度变化引起的基线漂移。
(3)污染或气体循环池
(4)探测器出口堵塞。(高压导致循环水池窗口的爆裂,产生噪声基线)
(5)不正确的流量比或流量变化
(6)柱的平衡是缓慢的,特别是当移动相发生变化时。
(7)由低质量的溶剂污染、变质或制备。
(8)个样品具有较强的保留力(高K‘值)至汕头峰
(9)洗脱样品,显示基线逐渐增加。回收溶剂不使用,不推广.. 探测器未调整..
高效液相色谱仪操作进样阀的问题
1、进样量的控制。
用进样阀来进样时,阀内的样品环是定量的,(一般分析型进样阀的样品环体积为20ul),由于进样时,注射到进样阀内的样品溶液在样品环的管路中有径向的速度梯度(即管轴处比管壁处的液流速度快)。因此,要想使样品环中充满样品溶液,从而使用进样阀来准确地定量,则必须使进样量大于样品环体积的2倍。
2、进样阀的清洁问题。
如果样品环中有上次进样时样品的残留,必然会污染下次注射进的样品,为防止这种现象的发生,应按步骤操作。
3、进样阀溢流管的堵塞。
有时,高效液相色谱,进样阀的溢流管会发生堵塞现象,向进样阀内注射样品时,注射针推不动。此故障是由于溢流管的堵塞所致。堵塞的原因多半是由于溶解样品的流动相用的是盐溶液,而其中的盐在溢流管的排空端口处结晶所致。此时,可用小烧杯盛少量蒸馏水对溢流管口稍加浸泡,端口处盐的结晶就能被溶解掉,故障排除。如能在每次进样完成之后,高效液相色谱哪家质量好,用蒸馏水反复冲洗至溢流管中的盐分全部冲出,则可避免此故障的发生。
HPLC分析流程图
现代HPLC一般都做成一个个单元组件,高效液相色谱哪个稳定性好,然后根据分析要求将各所需单元组件组合起来。
基本的组件是高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器和数据系统(目前基本上为色谱工作站,记录仪和积分仪已很少见)。
此外,还可根据需要配置流动相在线脱气装置、梯度洗脱装置、自动进样系统、柱后衍生系统、样品收集系统和全自动控制系统等。
HPLC的工作过程:输液泵将流动相以稳定的流速(或压力)输送至分析体系,在色谱柱之前通过进样器将样品导入,流动相将样品带入色谱柱,在色谱柱中各组分因在固定相中的分配系数或吸附力大小的不同而被分离,并依次随流动相流至检测器,检测到的信号送至数据系统记录、处理以及保存。