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低温为什么可以进行生物样品的保存？主要是因为：水份是生物样品里的主要成份，而在深低温，即温度低于-80℃，水存在晶体状态和玻璃态2种物理方式。而从热力学角度分析，水的这2种状态的水分子都具有很高的粘度，快速程序降温仪，并且几乎不会扩展。水的这个在深低温下几乎不会扩散的特性为生物样品的低温保存提供了可能。深低温状态下水存在的晶体状态和玻璃态2种状态，程控降温仪，低温保存也同样分为慢速降温和快速降温（玻璃化）2种方式。

细胞冷冻保存，1. 材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene　)、0. 4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法：(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟---gt;-20 ℃30分钟---gt;-80 ℃ 16～18小时(或隔夜)---gt;液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量，亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温：利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1～-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。

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