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- 发布时间
- 2023-10-29 10:06:38
基因微阵列芯片的制备方法
探针设计：首先确定研究的基因或基因组区域，然后设计相应的探针序列。探针可以是DNA片段、cDNA片段或寡核苷酸，长度通常为20到70个碱基。
探针合成：将设计好的探针序列进行合成。合成可以通过化学合成方法或基于光掩膜技术的光刻方法进行。
探针标记：为了在芯片上进行检测，探针需要进行标记。标记可以使用荧光染料、fang射性同位素、生物素等不同的方法。标记的选择取决于实验需求和检测平台。
芯片制备：将探针固定在芯片表面上。通常使用玻璃片或硅片作为芯片基底，表面经过特殊处理以提高探针的固定效果。探针可以通过打印、合成或接头的方式固定在芯片上。
打印方法：探针溶液被喷洒、喷射或压印在芯片表面的预定位置上。打印方法可以是喷墨式打印、喷气式打印或机械式打印。
合成方法：探针在芯片表面上进行化学合成，通常采用光刻或微流控技术。光刻方法通过光照和化学反应逐步合成探针。微流控技术通过微型反应池和微流体控制实现探针的合成。
接头方法：探针通过接头分子固定在芯片上。接头分子可以是寡核苷酸、分子链或分子修饰基团。
芯片验证和质控：制备完成的芯片需要进行验证和质控，以确保探针的质量和可靠性。常见的验证方法包括探针序列分析、杂交效率测试和标记信号强度检测。
制备基因微阵列芯片需要专门的设备和技术，常见的芯片制备平台包括Affymetrix、Agilent、Illumina等。此外，制备过程中需要注意探针的选择、标记的稳定性、芯片表面的均匀性和芯片存储条件等因素，以确保芯片的准确性和重复性。
? 灵活性：随着微流体研究的发展，其应用也在增长。例如，玻璃微流控芯片，柔性电子研究人员已经开始使用 PDMS 微芯片，因为它具有灵活性。
? 生物惰性： PDMS 是一种生物惰性材料，可确保其在生物应用中的中性，使其成为细胞培养基质的合适选择。
? 可调节性： PDMS 的弹性模量相对较低，可通过调整固化剂比例轻松调节，从而提供广泛的材料刚度。还有一些方法可以调整 PDMS 微流控芯片的电学和热学特性。
? 透气性： PDMS 是一种透气性材料，与 PMMA 和 PC 不同，氧气的扩散系数约为μm2/s ，CO2 的扩散系数约为 1000μm2/s。这使 PDMS 在长期细胞培养中具有优势。然而，这种渗透也会导致疏水性小分子非特异性吸收到微流体通道中。
优点：良好的耐水解性，耐酸碱性和大多数有机极性溶剂，对波长250nm以上的光具有高透明度，低自发荧光，低双折射，高阿贝数和高耐热性，低吸水性，高尺寸稳定性；
缺点：注塑成型，疏水表面处理以减轻分析物的吸附并降低细胞的粘附都需要昂贵的设备；
常见应用：包装薄膜，镜片，药shui瓶，显示器，医liao器械；
潜在应用：设计用于使用集成电路进行生物检测的芯片实验室系统；
成型方法：单螺杆和双螺杆挤出，注塑，注射吹塑和拉伸吹塑（ISBM），压缩成型，挤出涂布，双轴取向，热成型等等；
粘合方法：溶剂粘合（芯片-HPLC应用），粘合剂和热熔粘合，通过等离子体处理提高粘合强度；
玻璃化转变温度：70-177℃（取决于聚合物含量）。