奶酪 / 芝士霉菌总数微生物检测 GB 4789.15 标准 SN/T 2552.3 ISO 6611
奶酪 / 芝士霉菌总数微生物检测 GB 4789.15 标准 SN/T 2552.3 ISO 6611
奶酪 / 芝士霉菌总数微生物检测 GB 4789.15 标准 SN/T 2552.3 ISO 6611

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2026-07-20 11:27:47
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奶酪 / 芝士霉菌总数微生物检测一、执行标准1. 检验方法标准(强制通用)

GB 4789.15-2016《霉菌和酵母计数》(国内法定检测方法)安安网乳制品专用行标:SN/T 2552.3-2010 乳及乳制品酵母、霉菌计数国际乳制品标准:ISO 6611 乳与乳制品霉菌酵母计数ISO

2. 产品限量判定标准

GB 5420 干酪(原制奶酪)普通干酪(蓝纹 / 霉菌成熟干酪除外):霉菌≤50 CFU/g;蓝纹奶酪、布里等霉菌成熟型干酪无此限量(工艺刻意接种霉菌)随申Hi-...

GB 再制干酪 / 芝士片 / 芝士块霉菌限值:≤50 CFU/g,不适用于添加活性发酵菌种产品海关总署科...

二、仪器与试剂1. 设备

无菌均质袋、拍击式均质器、恒温培养箱(28℃±1℃)、90mm 无菌平皿、1mL 无菌吸管、电子天平(0.1g)、高压灭菌锅、生物安全柜。

2. 培养基(二选一)

马铃薯葡萄糖琼脂 PDA(推荐乳制品):抑制细菌,适合奶酪高脂基质;可加氯霉素抑制杂菌。

孟加拉红琼脂(虎红琼脂):限制霉菌蔓延,菌落边界清晰,计数更方便。

3. 稀释液

无菌生理盐水 / 无菌磷酸盐缓冲液(0.1% 蛋白胨水,乳制品)

三、标准操作流程(平板计数法)步骤 1 样品前处理(奶酪高脂易结块,均质重点)

无菌称取 25 g 切碎奶酪样品,放入均质袋;

加入 225 mL 无菌稀释液,制成 1:10(10⁻¹)基础匀液;

均质器拍打 1~2 min,充分打散油脂、酪蛋白团块,静置去除泡沫。

步骤 2 梯度稀释

取 1mL 10⁻¹ 匀液加入 9mL 稀释液,混匀得 10⁻²;

依此稀释至 10⁻³、10⁻⁴;奶酪霉菌污染轻,一般做到 10⁻³ 足够;

每个稀释度做2 个平行平板,做空白稀释液对照。

步骤 3 倾注接种

各稀释度取 1 mL 匀液至无菌平皿;

立刻倾注冷却至 45~50℃的 PDA / 孟加拉红琼脂 20~25 mL;

轻轻转动平皿混匀,水平静置凝固。

步骤 4 培养

平板倒置,28℃±1℃恒温培养 5 d,全程避光有氧培养。乳制品出入境标准 SN/T 为 25℃±1℃培养 5d,内外检按需选择。

步骤 5 菌落区分与计数

选取平板菌落数 10~150 CFU 区间计算;

区分两类菌落:

霉菌:绒毛状、絮状、有菌丝,有色(绿 / 黑 / 黄 / 白);

酵母:光滑凸起、奶油色小圆点,无绒毛;

平板霉菌长满蔓延无法计数标注 “多不可计”;

同稀释度两块平板取平均值。

四、结果计算公式

霉菌总数(CFU/g)= 平均霉菌菌落数 × 稀释倍数

报告修约规则

<10 CFU:保留 1 位有效数字;

10~100 CFU:保留 2 位有效数字;

≥100 CFU:两位有效数字 + 10ⁿ指数;

空白平板长菌→本次实验作废重测。

五、奶酪检测关键难点与质控要点

高脂奶酪分层均质不充分会导致霉菌包裹在脂肪团内,结果偏低;均质时间不少于 1min。

发酵奶酪自带酵母菌干扰PDA 加氯霉素可抑制乳酸菌、杂菌,只保留霉菌与酵母。

蓝纹奶酪特殊判定蓝纹干酪本身接种娄地青霉,不执行≤50 CFU/g 限值,仅监控外源污染杂霉;普通芝士片、奶油奶酪严格执行 50 CFU/g。

污染超标常见原因原料生乳带霉、包装灭菌不足、车间冷却间温湿度偏高、冷链断裂、切割设备未消毒。

六、快速筛查 / 附加检测

真菌毒素同步检测:奶酪配套测黄曲霉毒素 M₁(GB 5009.24);

快速方法:霉菌 ATP 荧光快速筛查(生产车间内控),仅作初筛,出厂报告必须平板国标法。

七、合格判定示例

例:芝士片 10⁻² 平板平均霉菌 22 CFU霉菌总数 = 22×100=2200 CFU/g >50 CFU/g → 不合格例:奶油奶酪 10⁻¹ 平板平均 4 CFU霉菌总数 = 4×10=40 CFU/g ≤50 CFU/g → 合格

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