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- 2026-07-20 11:27:47
GB 4789.15-2016《霉菌和酵母计数》(国内法定检测方法)安安网乳制品专用行标:SN/T 2552.3-2010 乳及乳制品酵母、霉菌计数国际乳制品标准:ISO 6611 乳与乳制品霉菌酵母计数ISO
2. 产品限量判定标准GB 5420 干酪(原制奶酪)普通干酪(蓝纹 / 霉菌成熟干酪除外):霉菌≤50 CFU/g;蓝纹奶酪、布里等霉菌成熟型干酪无此限量(工艺刻意接种霉菌)随申Hi-...
GB 再制干酪 / 芝士片 / 芝士块霉菌限值:≤50 CFU/g,不适用于添加活性发酵菌种产品海关总署科...
二、仪器与试剂1. 设备无菌均质袋、拍击式均质器、恒温培养箱(28℃±1℃)、90mm 无菌平皿、1mL 无菌吸管、电子天平(0.1g)、高压灭菌锅、生物安全柜。
2. 培养基(二选一)马铃薯葡萄糖琼脂 PDA(推荐乳制品):抑制细菌,适合奶酪高脂基质;可加氯霉素抑制杂菌。
孟加拉红琼脂(虎红琼脂):限制霉菌蔓延,菌落边界清晰,计数更方便。
3. 稀释液无菌生理盐水 / 无菌磷酸盐缓冲液(0.1% 蛋白胨水,乳制品)
三、标准操作流程(平板计数法)步骤 1 样品前处理(奶酪高脂易结块,均质重点)无菌称取 25 g 切碎奶酪样品,放入均质袋;
加入 225 mL 无菌稀释液,制成 1:10(10⁻¹)基础匀液;
均质器拍打 1~2 min,充分打散油脂、酪蛋白团块,静置去除泡沫。
步骤 2 梯度稀释取 1mL 10⁻¹ 匀液加入 9mL 稀释液,混匀得 10⁻²;
依此稀释至 10⁻³、10⁻⁴;奶酪霉菌污染轻,一般做到 10⁻³ 足够;
每个稀释度做2 个平行平板,做空白稀释液对照。
步骤 3 倾注接种各稀释度取 1 mL 匀液至无菌平皿;
立刻倾注冷却至 45~50℃的 PDA / 孟加拉红琼脂 20~25 mL;
轻轻转动平皿混匀,水平静置凝固。
步骤 4 培养平板倒置,28℃±1℃恒温培养 5 d,全程避光有氧培养。乳制品出入境标准 SN/T 为 25℃±1℃培养 5d,内外检按需选择。
步骤 5 菌落区分与计数选取平板菌落数 10~150 CFU 区间计算;
区分两类菌落:
霉菌:绒毛状、絮状、有菌丝,有色(绿 / 黑 / 黄 / 白);
酵母:光滑凸起、奶油色小圆点,无绒毛;
平板霉菌长满蔓延无法计数标注 “多不可计”;
同稀释度两块平板取平均值。
四、结果计算公式霉菌总数(CFU/g)= 平均霉菌菌落数 × 稀释倍数
报告修约规则<10 CFU:保留 1 位有效数字;
10~100 CFU:保留 2 位有效数字;
≥100 CFU:两位有效数字 + 10ⁿ指数;
空白平板长菌→本次实验作废重测。
五、奶酪检测关键难点与质控要点高脂奶酪分层均质不充分会导致霉菌包裹在脂肪团内,结果偏低;均质时间不少于 1min。
发酵奶酪自带酵母菌干扰PDA 加氯霉素可抑制乳酸菌、杂菌,只保留霉菌与酵母。
蓝纹奶酪特殊判定蓝纹干酪本身接种娄地青霉,不执行≤50 CFU/g 限值,仅监控外源污染杂霉;普通芝士片、奶油奶酪严格执行 50 CFU/g。
污染超标常见原因原料生乳带霉、包装灭菌不足、车间冷却间温湿度偏高、冷链断裂、切割设备未消毒。
六、快速筛查 / 附加检测真菌毒素同步检测:奶酪配套测黄曲霉毒素 M₁(GB 5009.24);
快速方法:霉菌 ATP 荧光快速筛查(生产车间内控),仅作初筛,出厂报告必须平板国标法。
七、合格判定示例例:芝士片 10⁻² 平板平均霉菌 22 CFU霉菌总数 = 22×100=2200 CFU/g >50 CFU/g → 不合格例:奶油奶酪 10⁻¹ 平板平均 4 CFU霉菌总数 = 4×10=40 CFU/g ≤50 CFU/g → 合格
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