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- 2019-11-26 14:12:22
广州劢博仪器有限公司产品服务包括：非洲猪瘟病毒检测、核酸提取纯化、PCR、荧光定量PCR、猪瘟检测、非洲猪瘟检测、全自动核酸提取纯化系统、病毒核酸提取系统、非洲猪瘟病毒快速检测试剂盒。我们的客户对象是食品企业/公司/厂、食品加工企业/公司/厂、冷冻食品加工企业/公司/厂、养殖场、养猪场、屠宰场、生猪屠宰场。
广州劢博--养殖场非洲猪瘟病毒检测
定量PCR已经从基于凝胶的低通量分析发展到高通量的荧光分析技术，即实时定量PCR。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied Biosystems公司推出，由于该技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃，而且与常规PCR相比，它具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点。实时定量PCR (real-time PCR)是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量，不需要取出PCR产物进行分离。
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PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步.
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在PCR扩增中，溶液中的模板变性后低温退火时，引物与探针同时与模板结合。在引物的介导下，沿模板向前延伸至探针结合处，发生链的置换，Taq酶的5′-3′外切酶活性（此活性是双链特异性的，游离的单链探针不受影响）将探针5′端连接的荧光基团从探针上切割下来，游离于反应体系中，从而脱离3′端荧光淬灭基团的屏蔽，接受光刺激发出荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
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直接的方法指的是标记荧光的探针与扩增产物结合后即直接产生荧光，分子信标（molecular beacon）就属于这一类，它本质上是一种标记荧光的发夹探针，当探针分子呈发夹结构时，结合在其两端的荧光基团距离上接近，使得产生能量转移效应，而不发生荧光。当互补序列出现时，探针与DNA杂交，探针转变成一个开放的结构，呈线性，报告荧光基团与淬灭荧光基团彼此在空间上产生足够的分离，荧光基团脱离了淬灭基团的影响，从而产生可被检测到的荧光。
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生猪屠宰企业作为产业链条上的重要主体，防控动物疫病、保证产品质量安全是应尽的责任。屠宰厂(场)生产设施设备和环境一旦被污染，食品加工厂核酸提取纯化，病毒更易长期存活，更易在生猪和猪肉产品中循环扩增，成为病毒的“储存器”“扩增器”。生猪屠宰厂(场)连接着生猪产销等上下游环节，便于“顺藤摸瓜”及时发现和追溯潜在风险。相比其他环节，在生猪屠宰厂(场)开展检测更容易采集样品，实现最i大限度的检测覆盖面，结合临床和剖检情况综合判断。从目前情况看，大部分屠宰厂(场)能够开展非洲猪瘟病毒自检。
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对检测的要求是：生猪屠宰厂(场)应当在驻场官i方兽医监督下，按照生猪不同来源实施分批屠宰，每批生猪屠宰后，对暂储血液进行取样并检测非洲猪瘟病毒;或者根据实际情况，在生猪进场前以生猪运输车辆为单位采集全部生猪血液样品，混合后进行检测。屠宰过程中发现疑似非洲猪瘟典型病变的，要立即停止屠宰，将可i疑生猪转至隔离间，并采集病变组织和血液样品进行检测。对检测结果应用的要求是：屠宰厂(场)检测非洲猪瘟病毒为阴性且按照检疫规程检疫合格的，驻场官i方兽医方可出具动物检疫证明，并注明检测方法、日期和结果等信息。