小型蛋白电泳槽 龙方科技 电泳槽

转印电泳

转印电泳的分类及注意事项：

Western Blotting（蛋白质单项电泳后印迹转移）

Eastern Blotting（蛋白质双向电泳后印迹转移）

Southern Blotting（DNA印迹） Northern Blotting（RNA印迹）

在转印过程中要控制温度 ，在低温或者冷循环条件下进行

对于分子量大于100KD的蛋白质大分子不用半干转

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核酸电泳技术介绍

核酸电泳技术介绍

凝胶电泳分离核酸的基本原理凝胶电泳是分子生物学中鉴定、量化和纯化核酸的常用实验技术。 因其速度、简便性和通用性，该方法广泛应用于核酸的分离和分析。 采用凝胶电泳法，可在几分钟到数小时内分离出约0.1 - 25 kbp范围内的核酸，且可高纯、高效地从凝胶中回收分离的核酸。

该项技术主要，在大小、电荷和结构的基础上，将电场施加于带电分子混合物上并引起迁移。 中性至碱性pH值(图1A)范围内，核酸中核苷酸骨架上的磷酸基团带负电。 因此，每个核苷酸携带一个净负电荷，即，一个核酸分子的总电荷与核苷酸的总数或它的质量成正比。 换言之，DNA或RNA分子的荷质比是恒定的。 因此，它们在凝胶电泳中的迁移率主要取决于其大小（结构可比较时）（详细了解 核酸结构如何影响迁移）。 因此，当受到电场作用时，核酸从负极（阴极）向正极（阳极）迁移，小型蛋白电泳槽，较短的碎片比较长的碎片移动得更快，导致基于尺寸的分离。

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转印电泳的一抗和二抗

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一抗孵育：将LG用稀释液稀释到适当的浓，在摇床上孵育2h（如果做过预实验后发现条带较淡，可以适当降低一抗稀释度或者延长一抗孵育时间）

洗膜：用PBST或者TBST洗膜5 X 5min，如果预实验中发现背景过高，转印电泳槽，可以增加洗膜时间或洗膜次数

二抗孵育：二抗是辣根过氧化物酶(HRP)标记的LG， 摇床上孵育2h（如果做过预实验后发现条带较淡，可适当降低延长二抗孵育时间）

洗膜：用PBST或者TBST洗膜3 X 10min

T：Tween-20（去污剂）

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